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胃癌是全球范围内最常见的消化道恶性肿瘤之一,患者预后较差,严重威胁人类健康。其发生发展是一个多因素和多方面互相作用的长期过程,涉及了癌基因的激活、抑癌基因的失活、细胞内信号传导通路异常以及多种生物因子共同作用等多个方面。从GLOBOCAN的近期统计结果可知,2018年全世界范围内胃癌新发患者数约为103.3万例(1/18),死亡患者将近78.3万例(1/12),位于恶性肿瘤疾病发病率排名的第5位、死亡率排名第2位。在中国范围内,恶性肿瘤发病率的排名第2位是胃癌,死亡率更是位于第3位,近年来发病仍有不断上升且年轻化的趋势。胃癌发病初期多无不适主诉,而有症状患者已多数为中、晚期,治疗效果不佳,而且后续生活质量低下,所以寻找新的治疗方法已经迫在眉睫。在完善原有治疗措施的前提下,这些年来世界上肿瘤学及相关学科专注于靶向治疗的研究,获得恰当高效的肿瘤作用靶点对于恶性肿瘤患者来说是巨大的希望。胃癌的发生、发展、转移及预后过程,与肝细胞生长因子及其受体(HGF/c-Met)信号通路与有密切的关系,而ERK通路是其中重要的组成部分,也是胃癌靶向治疗极具潜力的通路,对其进行深入研究将会有助于胃癌的诊断和治疗。本研究旨在通过利用中国医科大学第一附属医院胃肠肿瘤外科,胃肠肿瘤精准诊疗教育部重点实验室数据库中长时间积累的胃癌患者的临床、病理及随访信息等数据资料,采用免疫组化技术并结合临床流行病学方法,分析HGF/c-Met的表达与胃癌的临床病理特征之间的关系及其对预后的影响;细胞生物学部分,应用细胞生长实验及划痕实验,研究HGF/c-Met对胃癌细胞生长及迁移能力的影响,为胃癌高危人群的广泛筛查、早期疾病诊断和后续靶向治疗提供有力的理论依据。第一部分胃癌组织中HGF、c-Met和p-Erk分子的表达及与患者预后的生存分析目的:肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)、肝细胞生长因子受体(mesenchymal epithelial transition factor,c-Met)、及下游信号通路分子磷酸化的Erk(p-Erk)表达与临床病理参数间的关系及其意义。研究HGF、c-Met、p-Erk表达对胃癌患者生存的影响。方法:应用免疫组化方法检测71例胃癌患者手术切除的癌组织及53例癌旁正常组织中HGF、c-Met、p-Erk的表达情况,分析其与胃癌临床病理参数之间的关系及在胃癌组织中表达的相关性。应用生存K-M曲线单因素分析及COX多因素分析,并且通过分析KM-plotter数据库中胃癌患者预后数据,探究HGF、c-Met、p-Erk表达对胃癌患者生存期的影响。结果:HGF、c-Met、p-Erk在胃癌组织中的表达显著高于癌旁正常组织(P<0.05)。三者在胃癌组织中的表达均与性别、年龄、主癌部位、病理组织分型无关(P>0.05),而与肿瘤的大小、病理组织生长方式、浸润深度、淋巴结转移、术后复发转移显著相关(P<0.05)。在胃癌组织中,p-Erk与HGF的表达呈正相关(r=0.666,P<0.05),p-Erk与c-Met的表达呈正相关(r=.587,P<0.05),HGF与c-Met的表达呈正相关(r=0.576,P<0.05)。生存分析提示三者的阳性表达明显降低胃癌患者术后5年的生存期。KM-plotter数据库提示HGF、c-met及p-Erk在胃癌组织中高表达且预后不良。应用Cox比例风险模型分析,单因素分析结果显示主癌大小、浸润深度、有无淋巴结转移、是否发生复发及三者在胃癌中的表达程度能够显著影响胃癌患者的预后;多因素结果显示是否发生复发及p-Erk的表达程度是胃癌患者的独立预后因素。结论:HGF、c-Met、p-Erk在胃癌组织中的表达显著升高,三者与胃癌的发生、发展密切相关,可能协同参与胃癌的发生发展。第二部分HGF/c-Met及下游Erk信号通路对胃癌细胞MGC803生长及迁移能力的影响目的:通过研究HGF/c-Met及下游Erk信号通路对胃癌细胞MGC803生长及迁移的作用,探讨该信号通路对胃癌细胞生长及迁移的影响。方法:体外培养胃癌细胞MGC803,分为不同组别MGC803、MGC803+1ng/ml HGF、MGC803+100ng/ml HGF、MGC803+100ng/ml HGF+Crizotinib(c-met抑制剂)、MGC803+100ng/ml HGF+U0126(Erk抑制剂)进行处理,MTT生长实验及细胞划痕实验检验对胃癌细胞生长及迁移能力的作用。结果:HGF呈浓度和时间依赖性促进胃癌细胞MGC803生长及迁移。c-met抑制剂及erk抑制剂显著降低HGF对胃癌细胞MGC803生长及迁移的促进作用。结论:HGF/c-Met及下游Erk信号通路能够促进胃癌细胞MGC803的生长及迁移,抑制HGF/c-Met及下游Erk信号通路,能够降低HGF对胃癌细胞MGC803生长及迁移的促进作用。