不同来源铜绿假单胞菌运动性、耐药性、胞外多糖Psl产量与生物被膜形成能力的差异性研究

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铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)是一种革兰氏阴性菌,是一种环境微生物,同时也是一种条件致病菌。该菌具有很强的生存能力和环境适应性,在自然界分布广泛,从水、土壤、植物到人体的许多部位均可分离到。铜绿假单胞菌极易形成生物被膜,这也增强了它对抗生素耐受力和对不良环境的抵抗力。影响生物被膜形成的因素有许多,如胞外多糖、菌体表面附属物及运动性、群体感应和毒力因子的释放等等。因此,研究不同环境对铜绿假单胞菌生物被膜形成能力的影响,找出其中的规律和特性,能够为更有效的治疗不同铜绿假单胞菌的感染提供一定的理论基础。本研究首先针对不同来源的铜绿假单胞菌的胞外Psl产量和最低抑菌浓度之间的关系进行了研究,发现不同环境、地区来源的菌株耐药性存在差异,但菌株的耐药性并不取决于其生存的环境,而取决于该环境中是否有抗生素;多糖的产量并不直接影响浮游菌体的抗生素最低抑菌浓度,推测多糖产量高的菌与产量较低的菌很可能采用不同的耐药策略。测定了鞭毛介导的菌株游动能力(swimming)、由ⅣV型菌毛介导的颤触能力(Twitching)和一种群体运动方式—丛集运动(swarming)。结果表明液体环境、自然环境和体表分离菌株大多具有运动性,体内菌株大多丧失部分或者全部运动能力。运动能力对于除了 CF病人体内的其他生存环境来说是很必要的。swarming相对swimming和twitching来说更复杂,影响因素更多。鞭毛对于swarming运动具有重要作用。群体感应是细茵自发产生、释放一些特定的信号分子,并能感知其浓度变化,从而调节微生物的群体行为,例如毒力因子(绿脓素和弹性蛋白酶)的大量释放及生物被膜的形成等。铜绿假单胞菌可产生两种类型的信号分子,短链信号分子和长链信号分子。测定了这些菌株的群体感应型号分子产生能力以及毒力因子的释放水平。结果显示人体来源且大多为CF病人来源的毒力因子释放水平及信号分子产生能力均比较弱。群感效应对于弹性蛋白酶的释放具有决定作用,但是绿脓素释放除受到群体感应控制之外,还受到其他因素的影响。生物被膜形成的初期必须经过细菌的吸附。吸附能力能在一定程度上反映生物被膜形成能力,吸附能力测定结果显示自然环境来源的菌株具有吸附能力的比例远大于人体环境,且液体环境中具有吸附能力的菌株比例也较高,体表菌株中具有吸附能力和强吸附能力比例要远大于体内。影响吸附能力的因素有许多,除Psl产量、鞭毛和菌毛外,群体感应信号分子、弹性蛋白酶分泌等也可能对吸附能力具有影响。总体来说,生存环境对于菌株的运动性、耐药性、胞外多糖分泌、毒力因子释放和吸附能力等具有很大的影响。细胞表面和胞外因子(鞭毛、菌毛、毒力因子、胞外多糖和群体感应信号分子等)缺失菌株多来自人体,且大部分为CF病人来源菌株,这些菌株表面因子缺失且同时具有耐药性,这可能是人体免疫系统和抗生素长期选择的结果。
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