Notch2 NRR蛋白的表达与纯化

来源 :长春理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zcom0907
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Notch信号通路在动物的生长中具有很重要的作用,尤其是对动物的发育有很深的影响。研究表明Notch信号与多种疾病有密切的关系,特别是在肿瘤的形成和发展中,Notch信号通过不同的方式来影响肿瘤,因此Notch受体可以作为一个治疗癌症的靶点。  本论文通过构建一个包含Notch2负调节区NRR(文中简称NRR2)序列的载体,进而表达Notch2的负调节区蛋白,通过蛋白纯化的方法得到纯化的Notch2负调节区NRR蛋白,进而可以在体外测定其和目标化合物的亲和力,从而对潜在的天然配体进行大规模的初步筛选。  本论文中成功构建了带有六聚组氨酸标签的Notch2负调节区NRR序列的载体,并成功进行了蛋白表达,进过酶切、电泳以及序列测定等方法,确定得到的载体序列(大小为800bp)和蛋白(分子量为28KDa)都是正确的,进一步通过蛋白纯化的方法得到了纯度为85%的Notch2负调节区NRR蛋白。
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