石墨烯导管促进周围神经长段缺损再生研究

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目的周围神经缺损伤广泛发生于严重外伤后,常引起支配区域的感觉和运动功能障碍,极大影响患者生活质量,且疗效不佳。神经导管的应用逐渐成为替代方案。为了最大限度地模拟体内生长环境,理想的神经导管应具备机械引导、电流传导和刺激血管再生的功能。然而大部分神经导管只能起到机械性通道的作用,因此神经修复情况仍不满意。本课题将制备氧化石墨烯纳米粒/聚己内酯导电神经导管,并探究其在促进周围神经长段缺损再生中的作用,同时探讨潜在修复机制。方法采用一体成型工艺制备氧化石墨烯/聚己内酯神经导管,通过扫描电镜和透射电镜分别观察导管表面结构和氧化石墨烯纳米颗粒结构;此外,检测氧化石墨烯与聚己内酯间作用力、神经导管弹性模量、断裂伸长率及导电能力。分别制备氧化石墨烯/聚己内酯支架和聚己内酯支架,体外实验培养施旺细胞,观察施旺细胞在不同支架上的形态结构,通过活死细胞染色、CCK法、免疫荧光染色、WesternBlot、q-PCR法检测细胞毒性、增殖、黏附水平及神经标记物表达。建立15mm大鼠坐骨神经缺损模型,在术后6周、12周和18周评估功能学、电生理学、组织形态学水平,同时检测损伤区域微血管化程度,并测定血管形成相关信号通路表达。结果氧化石墨烯/聚己内酯导管为多层多孔结构,呈现出良好的机械性能和导电性能,同时明显促进施旺细胞活性。体内实验显示,氧化石墨烯/聚己内酯导管组的轴突和髓鞘再生水平与自体神经移植疗效接近,明显优于聚己内酯导管对照组。此外,氧化石墨烯/聚己内酯导管还能促进微血管形成,而AKT-eNOS-VEGF信号通路可能在此过程中起重要作用。结论氧化石墨烯/聚己内酯神经导管具有良好机械强度、导电性和生物相容性,能显著促进长段周围神经缺损再生并改善血管微环境,在神经组织工程领域有巨大潜力。
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