松花粉多糖具有非常高的营养价值和免疫增强作用。松花粉多糖与某些化学合成的免疫调节剂相比，具有来源广泛、毒副作用低、无致癌作用、安全性高等众多优点。乳酸杆菌是世界公认的应用最早，应用历史最长的微生物添加剂，也是动物肠道的优势菌群之一，众多研究表明它具有改善机体代谢、促进肠道有益菌增殖、抑制有害菌生长和增强机体免疫等作用。随着抗生素所产生的一系列问题逐渐得到人们的关注和重视，研究新型安全、有效的免疫增强剂成为畜牧业发展的需要。松花粉多糖和乳酸杆菌均有一定的免疫增强作用，但对二者的共同研究国内外未有报道。本试验从本实验室保存的禽波氏杆菌菌株中筛选出交叉免疫性好同时毒力强的P5株作为疫苗用菌株，采用超声波破碎、TritonX-100处理技术提取了禽波氏杆菌OMP，然后用Bradford方法测定禽波氏杆菌OMP含量，进行SDS-PAGE检测。同时用水提醇沉法提取松花粉多糖，最后采取一定加工工艺配制松花粉多糖含量为100mg/ml，禽波氏杆菌OMP含量为750μg/ml的亚单位疫苗和不含松花粉多糖的禽波氏杆菌亚单位疫苗，将制备好的疫苗进行无菌检验和安全性检验。第一部分泰山松花粉多糖和乳酸杆菌对禽波氏杆菌OMP亚单位疫苗免疫增强的协同作用为了研究泰山松花粉多糖和乳酸杆菌对禽波氏杆菌OMP亚单位疫苗免疫力的影响，取1日龄SPF雏鸡300只，随机分为6组，I～V组分别免疫含有松花粉多糖100mg/ml的禽波氏杆菌OMP亚单位疫苗，VI组只免疫禽波氏杆菌OMP亚单位疫苗，I、II组在前两周分别口服高、低剂量的乳酸杆菌活菌菌液1ml， III、IV分别口服高、低剂量的乳酸杆菌热灭活菌菌液1ml。在首免后，每周采取血液和小肠，用间接ELISA法检测血清抗体水平、MTT法检测外周血淋巴细胞转化率﹑全自动血细胞分析仪测定外周血淋巴细胞比率、ELISA法检测小肠sIgA含量和IL-2水平。结果表明，I～IV组抗体水平、IL-2含量、淋巴细胞比率、淋巴细胞转化率、sIgA含量显著高于V组、VI组（P＜0.05）；V组各检测指标显著高于VI组（P＜0.05）；乳酸杆菌活菌组各检测指标比灭活菌组略高，高剂量组略高于低剂量组。因此，泰山松花粉多糖作为免疫佐剂能显著提高疫苗的免疫效果，同时口服乳酸杆菌能进一步增强动物对疫苗的免疫应答能力，乳酸杆菌活菌比热灭活菌、高剂量组比低剂量组免疫增强效果好，但差异均不显著。由此得出，泰山松花粉多糖和乳酸杆菌对增强禽波氏杆菌OMP疫苗的免疫力有协同作用。第二部分松花粉多糖对乳酸杆菌生长的影响及抗病毒作用的研究用提取的松花粉多糖配制不同浓度液体培养基，将相同剂量乳酸杆菌在不同浓度松花粉培养液中培养，分别测定在0h、18h和24h稀释10倍后含不同浓度松花粉多糖的细菌培养液和对照组细菌培养液在波长360处的吸光度（A）值，计算各培养基吸光度增加值（DA），结果表明松花粉多糖能促进乳酸杆菌的生长，而且浓度为10mg/ml时效果最好。用SPF鸡胚接种法检测松花粉多糖、二者共同培养液滤菌之后不同作用时间对新城疫病毒的抑制作用，结果显示，松花粉多糖和乳酸杆菌共同培养发酵组血凝价低于松花粉多糖单独刺激组，两组的血凝价均低于病毒对照组，且均随作用时间的延长而降低。第三部分松花粉多糖和乳酸杆菌协同增强小鼠免疫功能的研究为了研究口服乳酸杆菌和泰山松花粉多糖对小鼠免疫功能的影响，本研究通过体外试验测定不同浓度的松花粉多糖对乳酸杆菌的体外生长的影响，选取效果最好的浓度的松花粉多糖（10mg/ml）与乳酸杆菌（1×109CFU/ml）共同培养，用二者共同培养液刺激小鼠淋巴细胞，观察淋巴细胞的增殖和IL-2的分泌情况；然后体内试验选取清洁级昆明小鼠（雌性）240只，随机分为4组（I～IV），在试验的前两周，I组灌喂定量乳酸杆菌；II组灌喂定量乳酸杆菌和泰山松花粉多糖；III组灌喂定量泰山松花粉多糖；IV组为对照组。试验的第3天，各组均注射禽波氏杆菌OMP亚单位疫苗。在免疫后，每周采取血液和小肠，用间接ELISA法检测血清抗体、全自动血细胞分析仪测定外周血淋巴细胞比率，ELISA法检测小肠sIgA含量和血清IL-2含量。结果表明，松花粉多糖和乳酸杆菌培养液具有促进小鼠淋巴细胞的增殖和IL-2的分泌的作用，而且二者共同培养液效果最显著（P<0.05）；体内试验证明，在大部分检测时间点，I、II、 III组的各指标均显著高于IV组（对照组）（P<0.05），II组的各指标显著高于I、III组（P<0.05）。结合体内和体外试验，可见乳酸杆菌和泰山松花粉多糖对提高小鼠的免疫功能有协同作用。