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缝隙连接是细胞间的通讯方式之一。有大量的形态和电生理数据证实了水平细胞之间存在大量的缝隙连接,并在侧向抑制中发挥重要作用。
本文根据缝隙连接蛋白亚基connexin超家族中的氨基酸顺序的保守性和家兔密码子偏爱性,利用反转录聚合酶链式反应扩增家兔视网膜cDNA,得到兔缝隙连接蛋白50,57(即Cx50,Cx57)的部分核酸序列。根据兔Cx50,Cx57的核酸序列设计特异性引物,采用单细胞多重反转录聚合酶链式反应技术,在急性分离的兔视网膜水平细胞中,检测到兔Cx50,Cx57的转录产物。将兔Cx50,Cx57全长序列克隆到爪蟾卵母细胞表达载体中,构建了兔Cx50,Cx57绿色荧光蛋白C端融合表达质粒。在爪蟾卵母细胞中检测到了Cx50-GFP融合蛋白的表达,为后续的电生理实验打下了基础。