紫花苜蓿(Medicago sativa L.)作为畜牧业发展中极为重要的牧草。其具有蛋白质含量富丰、适口性好等特点,是豆科植物中营养价值最高的牧草。我国苜蓿草产量供不应求,严重滞后了畜牧业的发展。干旱和盐胁迫严重影响了植物的营养生长与生殖生长,我国西北及华北地区旱地及盐碱土耕地所占面积比重较高。为了提高土地利用率以及减轻牧草与粮食作物间的竞争,利用分子育种手段培育抗旱耐盐的紫花苜蓿新品种,对我国草产业及畜牧业的发展具有深远意义。本研究依据优化了的紫花苜蓿高频再生体系,将从旱生植物胡杨及盐生植物秋茄中克隆的基因PeDREB2a::KcERF通过根癌农杆菌介导方法将其转入受体材料紫花苜蓿。现获得结果如下:(1)选取中苜1号、中苜3号、甘农4号作为植物材料;以叶片为外植体,通过筛选综合3种植物材料得到优化了的高频再生体系:最优愈伤组织诱导培养基为MS+0.2mg/L 6-BA+2 mg/L 2,4-D;最优分化培养基为1/2MS+20g蔗糖;最优生根培养基为1/2MS生根培养基+0.05mg/L IBA+0.05mg/L NAA。(2)经筛选以中苜1号和甘农4号作为受体材料,并以其叶片为外植体。依据优化后的再生体系,通过根癌农杆菌LBA4404介导将目的基因转入受体材料。试验得到转基因抗性(Kan)株系:中苜1号66株,甘农4号为27株。PCR检测阳性率分别为93.94%、88.89%。(3)通过RT-PCR检测证明转基因阳性植株在反转录水平上能够稳定表达;干旱胁迫及盐胁迫下24h,转基因株系中PeDREB2a、KcERF基因相对表达量在12h时最高;用20%PEG-3350和250mmol/LNaCl胁迫处理和生理指标检测,结果表明:转基因株系与野生型相比抗旱耐盐能力明显增强。