辐射诱导造血、免疫、生殖细胞凋亡的分子机制研究

来源 :兰州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:foonyun_117_126
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目的 1.研究辐射对骨髓、脾脏、胸腺、睾丸、肝脏细胞的凋亡及P53基因表达的影响。2.研究当归多糖(APS)对小鼠免疫、生殖功能辐射损伤的治疗作用及机理。 方法 1.X线全身照射小鼠,采用HE染色,用普通光镜、流式细胞仪(FCM)等技术手段检测细胞凋亡;用免疫组织化学方法:链霉素抗生物素蛋白-过氧化酶连接(S-P)法检测P53蛋白的表达。2.用外周血细胞计数,胸腺、脾脏、睾丸指数等方法观察了APS对X射线照射5Gy小鼠免疫、生殖功能的影响;采用流式细胞仪和S-P免疫组织化学方法检测APS对小鼠胸腺、脾脏、睾丸细胞凋亡率及P53蛋白表达的影响。 结果 1.照射剂量在2-8GY范围内,骨髓、脾脏、胸腺、睾丸、肝脏细胞凋亡率随照射剂量的增加而升高,各时间段凋亡率存在显著性差异(P<0.01)。2-8GY的X线照射后12小时内,骨髓、脾脏、胸腺、睾丸细胞凋亡率随时间的延长而增高,细胞周期阻滞于G1期,凋亡率最高在照射后8-12小时。肝脏照后凋亡率最高出现在24小时,S期和G2/M期阻滞细胞增多。2.P53蛋白于细胞凋亡时增加,与对照组有显著性差异(P<0.05),肝脏中P53蛋白的表达阴性。3.APS用药组,小鼠辐射损伤后第3天外周血象(WBC:3.1×10~9、PLT:295×10~9)高于单纯照射组(WBC:1.8×10~9 PLT:66.8×10~9)(P<0.05)。APS组辐射后第7天,胸腺、脾脏、睾丸指数(分别为17.4mg/10g、23.3mg/10g、32.5mg/10g)高于单纯照射组(分别为14.5mg/10g、14.7mg/10g、2.6mg/10g),差异显著(P<0.05)。照射后12小时,APS组与单纯照射组细胞凋亡率无明显差异(P>0.05)。给药后第7天,给药组细胞凋亡率与正常组无明显差异(P>0.05),APS组P53蛋白的表达低于单纯照射组,差异显著(P<0.05)。
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