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该文分为三部分:第一部分IGFs家族成分在维甲酸诱导马蹄内翻足畸形中的调控机制目的:维甲酸(retinoic Acid,RA)类物质是维生素A的衍生物,在调控多种组织和细胞的形态发生、增殖分化、生长发育、代谢及维持内环境的稳定等方面具有广泛的生物学活性.我们应用RA对不同发育时期的胎鼠进行诱导,构建骨骼发育畸形大鼠动物模型,研究遗传因素决定的先天畸形个体间对环境因素作用的易感性,阐明IGFs家族成员在骨骼发育畸形大鼠中的作用.结论:100~140mg/kg浓度的ATRA可以诱导大鼠骨骼畸形发育并产生CCF;IGFs家族基因中IGF-2和IGFBP-6表达的调控与大鼠骨骼发育以及成骨细胞的增殖密切相关.第二部分TCDD对成骨细胞中IGFs家族基因表达的抗雌激素作用目的:先天性骨骼发育畸形在出生缺陷中占11％,主要由遗传因素、致畸因子和环境因素相互作用,使骨骼生长发育失调而引起的复杂疾病.环境类激素具有分布广泛、生物蓄积、致畸致癌等激素样的生物效应.我们应用TCDD(二恶英)构建先天性骨骼发育畸形大鼠动物模型,并研究TCDD对雌激素促进成骨细胞增殖的拮抗作用,为阐明环境类物质TCDD的致畸作用及其作用机理,揭示在胚胎骨发育中环境因素对易感基因表达的调控机理.结论:在高雌激素水平下,TCDD可以诱导大鼠骨骼发育畸形;通过靶基因IGF-2和IGFBP-6,TCDD可发挥拮抗雌激素对成骨细胞的正性调节作用;TCDD和RA对大鼠骨骼发育具有协同致畸效应.第三部分IGFBP-6基因5-UTR中ERE的鉴定及功能分析目的:骨骼组织起源于胚胎期中胚层,维持正常的胚胎期骨骼发育需要多种生长因子、细胞因子和激素的参与,其中雌激素可通过多种途径作用于中胚层内间充质干细胞和骨细胞,调节其定向分化及活性,对骨代谢及维持正常骨发育起重要的调节作用.该实验深入研究在高雌激素状态下TCDD如何调节IGFBP-6基因转录,发现并证实IGFBP-6启动区功能性ERE的生物活性,为环境致畸剂诱导骨骼发育障碍的研究提供有意义的科学依据.结论:hIGFBP-6基因的5-UTR存在功能性的ERE,DNA序列为:AACTCTGACC(+94 to+103);TCDD干扰了ER与该ERE的结合而影响E2对该基因表达的调控,进而发挥对胚胎骨骼发育的致畸效应.