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目的应用活体共焦显微镜观察穿透性角膜移植(Penetrating Keratoplasty,PKP)术后角膜移植片内皮细胞的形态学变化,研究术后角膜移植片内皮细胞核异常显现的共焦显微镜图像特征及变化规律,探讨该现象发生的影响因素、临床意义和可能机制。资料和方法回顾性病例研究。收集了自1999年4月至2008年4月期间在邵逸夫医院眼科首次接受PKP手术治疗,且术后规律随访超过一年的患者的临床资料。在术后随访期间,定期记录共焦显微镜的检查图像,分析角膜移植片内皮细胞核异常显现患者的内皮细胞和细胞核的形态学变化,以及内皮细胞的密度、面积、六边形细胞比例、面积多形性变异率和内皮细胞的丢失率。对术后角膜移植片的存活状态,术后并发症及再次手术的情况进行分析和统计学处理。结果符合纳入标准的病例共94例94眼,术后平均随访时间为11.2±15.2月。94例患者术后1个月时角膜移植片内皮细胞平均密度为2365.1±313.6个/mm2,细胞排列规则、大小均匀,共焦显微镜下观察不到角膜内皮细胞的细胞核。随访期间,角膜内皮细胞密度和六边形细胞的比例逐渐减少,细胞的面积增大。部分患者的角膜移植片内皮细胞核的形态发生改变,由正常情况下共焦显微镜观察不到内皮细胞核到异常显现细胞核的反光。到末次随访时,共有16例(16/94,17.0%)患者共焦显微镜下观察到角膜移植片内皮细胞核的反光,其中男性9例,女性7例,平均年龄为41.3±14.5岁。共焦显微镜下首次观察到角膜移植片内皮细胞核异常显现的平均时间为术后26.2±11.6月,检查发现角膜内皮细胞面积增大、多边多形,内皮细胞内可透见明亮的细胞核反光,异常显现的内皮细胞核呈球形或卵形,大小约为10-12μm。部分细胞面积增大的内皮细胞内出现多个细胞核的反光。首次观察到移植片内皮细胞核异常显现时患者的平均内皮细胞密度为878.2±193.9个/mm2,细胞面积为1140.3±296.4μm2,六边形细胞比例为32.6±12.1%,面积多形性变异率为46.8±9.7%,内皮细胞丢失率为61.6±16.8%,与术后角膜移植片内皮细胞核未显现患者末次随访的结果比较差异有统计学意义(P<0.05,Mann-Whitney U Test).对PKP术后共焦显微镜下角膜移植片内皮细胞核异常显现进行Cox危险因素分析,发现与术后继发性青光眼、排斥反应和再次手术的发生在统计学上有相关性。结论本研究首次分析了PKP术后角膜移植片内皮细胞核异常显现的共焦显微镜图像特征、变化规律及其影响因素。PKP术后角膜移植片内皮细胞密度下降到900个/mm2以下,角膜内皮细胞形态结构会发生异常改变,呈现出细胞核的反光,这一现象是否预示角膜内皮细胞整体代偿功能接近临界状态,需进一步的研究。