肝癌是我国最常见和预后最差的恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率均居各种恶性肿瘤的前列。手术切除、消融、肝移植、肝动脉化疗栓塞等是最常见的肝癌治疗手段，但仍有一部分患者并不能从中获益，肝癌的多学科治疗是目前治疗肝癌的新的理念和新的模式。　　在我国，肝癌的发生发展大多与慢性病毒感染引起的炎症有关。肝癌组织中的免疫细胞与炎症因子是在肝癌进展中发挥重要作用。其中，具有肿瘤杀伤能力的CD8+T细胞是最主要的抗肿瘤的免疫细胞类型，因而调节肿瘤组织中的CD8+T细胞的数量与活性是重塑抗肿瘤免疫微环境的重要手段。肿瘤细胞可通过其表达的共抑制分子PD-L1识别T细胞表面的PD-1蛋白来抑制T细胞活性，使其耗竭并凋亡。因而靶向PD-L1/PD-1轴的免疫检查点阻断治疗是近年来用于肝癌治疗的新型免疫疗法。但现有的抗PD-L1/PD-1轴免疫疗法响应率普遍较低，有研究表明肿瘤细胞PD-L1的表达水平是影响患者响应免疫检查点阻断治疗的关键性因素。但目前对肿瘤细胞PD-L1表达的调控机制尚不完全清楚。　　本研究从表观遗传水平探讨EZH2调控肝癌细胞表达PD-L1的潜在机制，主要研究结果如下:　　我们发现在M(φ)-PD-L1+肝癌组织中，肿瘤细胞上的PD-L1与EZH2表达负相关。M(φ)-PD-L1+和M(φ)-PD-L1-肝癌组织的表达谱芯片分析显示T细胞免疫反应，如IFNγ通路的活化，在M(φ)-PD-L1+肝癌组织中更为活跃;体外实验进一步证实IFNγ是诱导肝癌细胞表达PD-L1的主要因子。qPCR，WB和FACs实验显示利用RNAi技术敲降肿瘤细胞EZH2的表达可以显著促进IFNγ对PD-L1的诱导作用。ChIP实验表明，在shEZH2细胞系的PD-L1基因启动子上H3K27me3水平更低。相比GSK126，DZNep具有更强的促IFNγ诱导PD-L1表达的作用，提示EZH2部分通过H3K27me3抑制IFNγ对PD-L1的诱导。　　Real-time PCR和western blot实验结果显示，EZH2并不能影响IFNγ/STAT1通路的激活。此外，放线菌酮处理肝癌细胞的实验显示EZH2也不影响PD-L1蛋白的稳定性。启动子荧光素酶报告基因实验表明，EZH2可以通过调节与PD-L1表达相关的转录因子的表达或活性调控PD-L1的转录。生物信息学预测提示IRF1就是这样的转录因子，突变PD-L1启动子上的IRF1结合元件后，siEZH2对IFNγ诱导的PD-L1转录促进作用显著削弱。Real-time PCR和western blot实验表明EZH2可以抑制IFNγ诱导的IRF1表达，表达动态实验显示IRF1表达的上调先于PD-L1，回复实验发现，敲降IRF1可以逆转EZH2对PD-L1的表达调控作用，这些结果共同说明，EZH2通过IRF1调控IFNγ诱导的PD-L1表达。ChIP实验结果显示，EZH2敲降的肝癌细胞中IRF1启动子上H3K27me3水平显著下调，提示EZH2通过上调IRF1基因启动子上H3K27me3的水平抑制其表达。　　肿瘤细胞的PD-L1是影响免疫检查点阻断治疗疗效的关键因素之一。我们的研究结果显示，EZH2可以通过H3K27me3调控PD-L1和IRF1的表达，揭示了EZH2调控PD-L1表达的表观遗传调控机制，为联合EZH2抑制剂和抗PD-L1/PD-1免疫检查点阻断疗法用于肝癌临床治疗提供理论支持，为有效的肝癌免疫治疗提供新思路。