T细胞疫苗诱导移植免疫耐受的实验研究

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目的 探讨T细胞疫苗诱导同种特异性免疫耐受的作用及其机理。方法 制备针对LOU/C大鼠的BN大鼠T细胞疫苗(LCTCV)及针对Lewis大鼠(同种无关抗原对照)的BN大鼠T细胞疫苗(LTCV)。用所制备的疫苗分别免疫正常BN大鼠,每周1次,连续3周,同时设空白对照,用RPMI1640培养液代替T细胞疫苗。于疫苗接种前和每次接种后第5天以被免疫BN大鼠的脾细胞作为反应细胞,以LOU/C大鼠的脾细胞作为刺激细胞(经丝裂霉素处理),进行单向混合淋巴细胞反应(MLR),同时对外周血T细胞凋亡和CD4+、CD8+T细胞亚群进行流式细胞分析。结果 MLR结果显示:在LCTCV免疫组,疫苗接种后反应细胞的免疫应答能力受到显著抑制,接种后的cpm值与接种前比较P<0.01、在LTCV免疫组,接种后的cpm值显著低于接种前(P<0.05)、在空白对照组,疫苗接种前后cpm值比较无显著差异(P>0.05)、组间相同时点cpm值比较,LCTCV免疫组和LTCV免疫组均显著低于空白对照组(P<0.01),LCTCV免疫组显著低于LTCV免疫组(P<0.01);在LCTCV免疫组和LTCV免疫组,外周血T细胞凋亡率接种后比接种前显著增加(P<0.01),而CD4/CD8于接种后明显减小(P<0.01)、LCTCV免疫组和LTCV免疫组对应时点组间比较差异不显著(P>0.05)、在空白对照组,T细胞凋亡率和CD4/CD8接种前后比较无显著差异(P>0.05)。结论 应用T细胞疫苗在3周内可以诱导出针对同种抗原的特异性免疫耐受;CD4‘T细胞特异性克隆删除可能在T细胞疫苗诱导免疫耐受中发挥重要作用;外周T细胞凋亡率的增加和cD4/cD。的减小与免疫耐受的形成密切相关,对外周T细胞凋亡率和CD‘/CD:的流式细胞分析可以作为判断免疫耐受状态的参考指标。
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