八正散单味中药及大黄与黄柏提取物体外抗沙眼衣原体活性研究

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目的1.分别检测八正散中单味中药及黄柏等7味清热利湿中药的体外抗沙眼衣原体活性;研究八正散组方中具有体外抗沙眼衣原体活性的中药间是否具有协同抗沙眼衣原体作用,揭示中药组方治疗的药理学基础;2.分别检测中药大黄、黄柏提取物即包括大黄酸、大黄素、黄柏酮、盐酸小檗碱等在内的16味中药单体体外抗沙眼衣原体活性;探讨复杂中药构成中起主要作用的成分;研究具有抗沙眼衣原体活性的各单体间的是否存在协同抗沙眼衣原体活性作用。方法1.应用微量McCoy细胞培养法分别检测八正散中单味中药及黄柏等7味清热利湿药体外抗沙眼衣原体的最小抑菌浓度(Minimal inhibitory concentration, MIC)和最小杀菌浓度(Minimal bactericidal concentration, MBC);2.应用微量McCoy细胞培养法分别检测大黄酸、大黄素、药根碱、掌叶防己碱、黄柏酮、盐酸小檗碱等在内的16味中药单体体外抗沙眼衣原体的MIC值和MBC值;3.运用棋盘格稀释法,将在初步检测中显示对沙眼衣原体有抑制和杀灭作用的中药间与中药单体间分别进行两两组合,在96孔板上进行稀释,应用微量McCoy细胞培养法检测两中药联用/两中药单体联用的部分抑菌浓度(fraction inhibitory concentration, FIC).结果1.生大黄、黄柏在体外有较强的抗沙眼衣原体活性,其MIC与MBC相同,分别为6.25mg/ml、12.5mg/ml。两味中药联合使用时既无拮抗,亦无协同,FIC值为1。其余中药未检测出MIC值与MBC值,但栀子、瞿麦、篇蓄、灯芯草、石菖蒲等在最大无毒浓度(TD0)时孔内沙眼衣原体包涵体数目较阳性对照明显减少,体积缩小2.大黄提取物芦荟大黄素、大黄素、大黄酸具有较强的抗沙眼衣原体活性,其MIC与MBC相同,分别为2.44ug/ml、4.89ug/ml、19.54ug/ml;黄柏提取物盐酸小檗碱具有卓越的抗沙眼衣原体活性,其MIC与MBC亦相同,为1.22ug/ml;3.中药单体大黄酸与芦荟大黄素、大黄酸与大黄素联合使用时有协同抗沙眼衣原体活性作用,FIC值分别为0.38、0.5;大黄素与芦荟大黄素、芦荟大黄素与盐酸小檗碱联合使用时既无既无拮抗,亦无协同,FIC值分别为0.53、1.03。结论1.生大黄、黄柏具有较强的体外抗沙眼衣原体活性,栀子、瞿麦、篇蓄、灯芯草、石菖蒲等有一定的体外抗沙眼衣原体活性。中药水提液对McCoy细胞有不同程度的毒性,可能掩盖某些药物的MIC值及MBC值。2.大黄提取物芦荟大黄素、大黄素、大黄酸与黄柏提取物盐酸小檗碱四种中药单体均具有较强的体外的抗沙眼衣原体活性,且抗沙眼衣原体能力优于中药水提液,值得进一步开发并用于临床沙眼衣原体感染患者。3.大黄的3种不同提取物大黄酸与芦荟大黄素、大黄酸与大黄素联合使用时有协同抗沙眼衣原体作用,为大黄抗沙眼衣原体活性提供了药理基础,为临床使用大黄治疗沙眼衣原体感染提供了药理依据。
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