上世纪80年代开始，对虾养殖业得到了迅速发展，这给沿海地区带来了可观的经济效益，但同时对虾疾病也给养殖带来了很大的困扰，造成了巨大的经济损失。近年来对虾的免疫学研究得到了长足进展，不断有免疫相关基因被克隆并得以深入研究。抗脂多糖因子（Anti-lipopolysaccharide factor，ALF）是发现于鲎和甲壳动物体内的一种重要的抗菌蛋白，具有广谱抗菌活性，对其进行深入研究将有利于对虾疾病的控制。本文以中国明对虾为材料，围绕其ALF（ALFFc）基因的重组表达展开研究，主要包括以下3个方面：　　 1.根据中国明对虾ALFFc基因设计引物，构建了pET-DsbA-ALFFc原核表达载体，对其进行了原核表达。由于常规方法诱导ALFFc基因表达会出现宿主“自杀”现象，难以获得重组蛋白，所以本研究尝试了“低温诱导法”，“DTT诱导法”，和“IPTG筛选法”　　 三种策略，均实现了重组蛋白的高表达。　　 2.对上述三种诱导方法进行比较，最终选择IPTG筛选法对DsbA-ALFFc重组蛋白进行大规模诱导表达，用His亲和层析柱纯化重组蛋白后免疫新西兰大白兔，制备了抗血清。经Western Blot检测在预期位置上得到了一条特异性条带。　　 3.构建了pPIC9K-ALFFc真核表达载体，用GS115宿主菌对ALFFc基因进行真核表达，并对发酵条件进行了摸索。用上述制备的抗血清做Western Blot检测，结果显示：在ALFFc预期位置出现了一条特异性条带，这说明成功地进行了目的蛋白的表达。　　 4.将等量的对虾组织蛋白样品包括血细胞、血清、鳃、肠、卵巢、肝胰脏和肌肉，进行15％的SDS-PAGE电泳分离后做Western Blot检测，结果显示：ALFFc主要存在于血细胞中，肠组织中出现较弱阳性信号，而血清及其他组织未见明显阳性信号，这说明健康对虾ALFFc蛋白主要贮存于血细胞中。