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目的：采用高脂饲料喂养联合低剂量链脲菌素（STZ）的方法制备糖尿病肾病（DN）大鼠模型，探讨高脂饲料喂养时间和STZ剂量对模型成模率和死亡率的影响，确定建立DN大鼠模型的最佳方案。根据最佳建模方案，建立高脂饲料喂养联合低剂量STZ诱导的DN大鼠模型，来探讨葛根素（Pue）对DN大鼠肾脏的保护作用及其作用机制，为临床应用Pue防治DN提供更深入的理论依据。方法：1. DN大鼠模型建立影响因素的研究雄性SD大鼠分为7组：（1）正常对照组（normal, N）,普通饲料喂养；（2）高脂饲料组（high fat, HF）,高脂饲料喂养；（3）模型-A组（model, M-A）,高脂饲料喂养满4周,腹腔注射STZ30mg/kg；（4）模型-B组（model, M-B）,高脂饲料喂养满4周,腹腔注射STZ35mg/kg；（5）模型-C组（model, M-C）,高脂饲料喂养满4周,腹腔注射STZ40mg/kg；（6）模型-D组（model, M-D）,高脂饲料喂养满6周,腹腔注射STZ30mg/kg；（7）模型-E组（model, M-E）,高脂饲料喂养满6周,腹腔注射STZ35mg/kg。STZ造模后,各组大鼠造模后继续喂养8周,观察大鼠的一般状况,每1周测定大鼠体重,每2周尾尖取血测定血糖值。实验满8周后,处死大鼠,计算肾重/体重比（KW/BW）, HE染色法观察大鼠胰腺的病理学改变情况, HE染色法和Masson染色法观察大鼠肾脏的病理学改变。2.葛根素对糖尿病肾病大鼠的作用及作用机制雄性SD大鼠先给予6周的高脂饮食后,腹腔注射STZ（35mg/kg）,诱导建立DN模型。72h后测定空腹血糖值,以血糖值≥11.1mol/L为模型成功的标准,模型成功后随机分为7组,即模型组、Pue组（50、100、200mg/kg）和阳性药对照组（依那普利、消渴丸和辛伐他汀）,另设正常对照组和高脂组。灌胃给药8周,实验期间观察大鼠的一般状况,每1周测定大鼠体重,每2周尾尖取血测定血糖值。实验满8周后,将大鼠放入代谢笼中,收集24h尿液,然后股动脉采血,分离血清,检测大鼠的24h尿蛋白总量（TPU）、24小时尿微量白蛋白（UmALB）、尿肌酐（Ucr）、尿素氮（BUN）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、血肌酐（Scr）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）。取大鼠肾脏和心脏,计算肾重/体重比（KW/BW）、心重/体重比（HW/BW）, HE染色法观察大鼠胰腺的病理学改变情况, HE染色法、Masson染色法和电镜观察大鼠肾脏的病理变化。免疫组化法检测大鼠肾脏皮质FN蛋白、IV型胶原、TGF-β1、TNF-α的表达情况。比较各组间的差异。结果：1. DN大鼠模型建立影响因素的研究1.1对大鼠体重的影响M-C、M-D和M-E组模型大鼠与正常对照组比较,体重显著降低,具有统计学意义。1.2对大鼠血糖的影响及成模率和死亡率M-E组（6w,35mg/kg）大鼠成模率高,血糖值比较理想,不同个体间大鼠的血糖值波动范围较小,出现多饮、多食、多尿的症状,精神状态较差毛发凌乱无光泽。1.3对大鼠肾重、肾重/体重比的影响M-E组（6W,35mg/kg）大鼠肾重/体重比（KW/BW）明显升高,肾代偿性增生最显著。1.4对大鼠胰腺组织病理学的影响正常对照组大鼠胰岛大小及形态正常,界限清晰；模型成功的大鼠胰岛遭到破坏,胰岛与周围腺泡界限不清,甚至失去胰岛结构,萎缩崩解,与周围组织混合。1.5对大鼠肾脏组织病理学的影响正常对照组大鼠肾小球结构清晰,球囊壁光滑,毛细血管腔清晰；模型成功的大鼠肾小球明显增大,肾小囊变窄,部分肾小球已硬化,肾小管部分出现细胞肥大,管腔变窄。正常对照组肾小球仅基底膜、系膜基质可见少许染成绿色的胶原纤维；模型成功大鼠肾小球可见大量染成绿色的胶原纤维。2.葛根素对糖尿病肾病大鼠的作用及作用机制2.1Pue对DN大鼠体重和血糖的影响模型组大鼠在第3周体重与正常对照组比较显著降低, Pue给药组大鼠体重较模型大鼠有下降减缓的趋势。与正常组比较, DN模型组大鼠的血糖水平显著升高, Pue（100mg/kg,200mg/kg）组在给药第6~8周后,较模型组血糖显著下降。2.2Pue对DN大鼠肾功能的影响模型大鼠血清的BUN、LDL和Scr水平显著升高,而HDL水平则显著下降；Pue（100mg/kg,200mg/kg）给药组对模型大鼠升高的BUN、LDL和Scr水平均有显著降低作用,对HDL水平有显著的提高作用。2.3Pue对DN大鼠肾重/体重比、心重/体重比的影响DN模型大鼠的肾重/体重比和心重/体重比较正常组大鼠显著升高, Pue（100mg/kg,200mg/kg）灌胃给药可显著降低模型大鼠异常升高的肾重/体重比和心重/体重比。2.4Pue对DN大鼠胰腺组织病理学的影响DN模型大鼠胰岛遭到明显的破坏,胰岛结构萎缩崩解,与周围组织混合；Pue给药后,胰岛的破坏得到有效的改善。2.5Pue对DN大鼠肾脏组织病理学的影响模型组大鼠肾小球明显增大,肾小囊变窄,系膜细胞增生,部分肾小球已硬化,部分肾小管细胞肥大,管腔变窄；在肾小球和肾小管部分可见大量绿色深染的胶原纤维。Pue给药后,肾小球体积减小,系膜细胞增生减少,有效地改善了肾小球肥大和纤维化的状态，也明显减少了胶原纤维在肾小球和肾小管中的表达。2.6. Pue对DN大鼠肾皮质表达FN蛋白、IV型胶原、TGF-β1、TNF-α的影响模型大鼠肾皮质FN蛋白、IV型胶原、TGF-β1、TNF-α的表达水平显著升高, Pue（100mg/kg,200mg/kg）给药对DN模型大鼠肾皮质FN蛋白、IV型胶原、TGF-β1、TNF-α的表达水平均有显著降低作用。结论：1. DN大鼠模型建立影响因素的研究M-E组（6w,35mg/kg）大鼠模型成模率高,死亡率低,血糖值较理想,模型稳定。M-E组（6w,35mg/kg）大鼠模型能较好地模拟出DN发生和发展过程中的病理变化,是较为理想的DN动物模型。2.葛根素对糖尿病肾病大鼠的作用及作用机制Pue灌胃给药对DN大鼠具有治疗作用,可明显降低DN大鼠的血糖,有效地改善DN大鼠的肾功能,明显改善DN大鼠的胰岛破坏和肾小球纤维化等的病理损伤,对DN具有明确的治疗作用。其作用机制与降低肾皮质对IV型胶原、FN蛋白的表达和TNF-α、TGF-β1炎性细胞因子水平有关。本研究为Pue预防和治疗DN提供了提供更深入的理论依据,在延缓DN的发生和发展具有重要的临床意义。