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本研究以新疆雪莲为材料进行愈伤组织诱导,系统分析了不同外植体诱导的愈伤组织、继代次数、接种量、通气量、光照时间和培养时间与反应器培养过程中新疆雪莲细胞生长状态的关系,并研究了温度对不同条件下反应器培养后愈伤组织再分化能力的影响,发现选用以茎为外植体诱导出的愈伤组织作为种源、3%接种量、16h/d的光照时间、0.4 L/min的通气量下培养15d时获得的愈伤组织再分化最好,出芽频率和平均出芽数分别为93%和2.22个/块,生物量也较大(9.94g FW/L)。最佳分化温度为18℃。继代次数与新疆雪莲反应器培养获得的生物量基本呈正相关,与反应器培养后的再分化能力呈明显负相关。同时测定了反应器培养过程中营养成分的消耗曲线和细胞生理生化指标变化曲线,探讨了这种动态过程与愈伤组织分化间的相关性,为后续培养分化提供依据和指导。
研究了光质、光周期、昼夜温差和低温处理时间对反应器大规模培养后的新疆雪莲愈伤组织再分化能力的影响。结果表明不同波长光对愈伤组织的再分化影响不同。随着光照时间的延长,愈伤组织的平均出芽数和分化频率大大增加并在16 h/d时达到最大,分别为76.7%和1.8个/块。在持续光照的条件下愈伤组织的分化能力反而下降,说明昼夜交替是愈伤组织分化所需要的。暗培养不适于新疆雪莲的分化出芽。