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研究了白牦牛卵母细胞体外成熟培养,就影响体外成熟的因素进行了进一步的探讨。结果表明:(1)在单因素多水平实验中发现,在含10%新生犊牛血清(NBCS)的TCM199中添加10μg/mlFSH(77.33%)、10μg/mlLH(79.45%)、1μg/mlE2(73.67%)和0.3mM丙酮酸钠(67.5%)能够显著促进卵母细胞体外成熟,与其它浓度组相比差异显著(P<0.05)。(2)分别用灭活和未灭活的NBCS培养卵母细胞,结果发现成熟率无显著差异(P>0.05)。(3)培养前将培养基分别平衡0h,5h,10h和20h,结果发现平衡20h卵母细胞体外成熟(80.8%)显著高于其他组(P<0.05)。(4)50μl微滴中分别培养5,10,15,20枚COCs,结果发现10枚/50μl的体外成熟率(68.29%)显著高于5枚/50μl的培养密度(43.33%,P<0.05),但与15和20枚/50μl差异不显著(P>0.05)。(5)将卵母细胞分别培养16h,20h,24h和28h,结果发现培养24h成熟率(68%)显著高于16h(24.5%,P<0.05),但与20h和28h相比差异不显著(P>0.05)。(6)中等卵泡的可用COCs比率为96.93%,高于大卵泡和小卵泡的92.00%和92.61%,而充血卵泡的可用COCs比率最低,为83.33%。中等卵泡体外培养成熟率(73.08%)也显著高于大卵泡、小卵泡和充血卵泡(53.12%,45.00%,0%,P<0.05)。以上结果说明,TCM199中添加10%NBCS,10μg/mlFSH,10μg/mlLH,1μg/ml17-βE2和0.3mM丙酮酸钠,在培养前平衡20h,培养24h有利于卵母细胞成熟;自中等卵泡采集的并且卵丘颗粒细胞包裹2层促进卵母细胞成熟;10枚/50μl的培养密度有利于卵母细胞体外成熟;卵巢长时间运输时,适当降低保存温度有利于卵母细胞成熟。