基于纳米金的电荷中和聚集及催化Tb3+/Eu3+发光的传感体系

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由于纳米金具有特殊的光学性质、高催化性能、电学性能和良好的生物相容性等优点,目前已成为国内外研究最热门的纳米材料之一。基于纳米金独特的表面等离子体共振效应、催化活性高以及信号表征途径的多样性,纳米金已被广泛应用于生物比色传感和催化领域来检测核酸、金属离子等目标物。核酸分子是基因表达的物质基础,携带着遗传信息,与生物的一系列生命活动有着紧密的联系,是生物医学研究的重要对象;稀土元素具有主族元素和过渡金属所无法比拟的光谱性质,在科技进步和工业发展中发挥着非常重要的作用。本工作将纳米金与最新传感分析技术相结合,以核酸和稀土离子为目标分析物,构建了高灵敏的新型纳米金传感探针分析方法,主要包括以下两个部分:1、基于核酸染料诱导纳米金(Au NPs)快速聚集,构建Au NPs无标记可视化检测DNA的比色传感新方法。Au NPs的聚集已被广泛用于无标记比色传感检测DNA,加盐是引起其聚集产生颜色变化的常用方法,但是盐的电荷屏蔽作用诱导Au NPs聚集是一个缓慢的动力学过程,很难进行定量和可重复的测量。本研究提出的基于核酸染料SYBR Green I(SG)进行电荷中和诱导纳米金快速聚集检测DNA的方法,是利用带正电荷的核酸染料通过电荷中和与带负电荷Au NPs相互作用,从而高效且稳定地组装Au NPs。因此,开发了SG诱导的Au NPs聚集的无标记比色传感平台。带正电荷的核酸染料可以嵌入到双链DNA(ds DNA)的沟槽中,避免其与Au NPs相互作用。基于ds DNA的形成或解离来调控Au NPs聚集,进而用于DNA的检测。该方法在检测时间、信号稳定性以及灵敏度方面都有极大的优势。可以实现对0.1 n M目标DNA的可视化检测;用分光光度法对目标DNA的检出限可达3 p M,比传统盐诱导聚集法低50倍。该法操作简便,无需分离、标记等步骤,在检测时间、信号稳定性和灵敏度方面都显著改善了基于Au NPs的比色传感器,并可拓展至其它任意序列DNA的检测,具有良好的应用前景。2、基于Au NPs能催化Na IO4-H2O2体系的化学发光,构建了一种Na IO4-H2O2-Au NPs化学发光体系检测稀土离子的传感方法。一般的传感体系都是通过催化作用进而来实现高灵敏分析,这种方式已广泛应用于环境分析、生物分析等多个领域。实验发现Au NPs在Na IO4-H2O2化学发光体系具有可以与辣根过氧化物酶相媲美的催化活性,从而建立Au NPs催化稀土离子的化学发光传感平台。通过自由基清除剂和自由基捕获剂分别对体系发光机理进行了验证,证明是Na IO4与H2O2氧化还原反应产生的活性氧1O2和·OH,通过配体EDTA将能量传递给稀土离子而发射出的特征化学发光光谱。考察了不同配体对该体系的影响,优化了体系配体、H2O2、Na IO4的浓度,比较了多种催化剂的催化效果以及溶液p H对体系的影响。在最优的条件下,利用化学发光仪以及特定波长的滤光片进行化学发光检测,实现了同时检测铽离子和铕离子,其检出限分别为5.0 n M和0.8μM。此方法具有灵敏度高、仪器操作简单快速、无光散射等背景干扰、能实现多组分检测的优点,为分析工作者对现有的检测方法提供了新的思路。
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