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目的:通过检测2型糖尿病(type2diabetes mellitus,T2DM)伴微量白蛋白尿患者、单纯T2DM患者以及健康人群的反应肠道黏膜屏障功能的血清学指标D-乳酸(D-lacticacid,DLA)、二胺氧化酶(diamine oxidase,DAO)、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)与外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)Toll样受体4(toll-like receptor4,TLR4)及其下游信号分子白介素-6(interleukin6,IL-6)、超敏C反应蛋白(high-sensitivity C-reactive protein,hs-CRP)水平的横断面研究,探讨肠道屏障功能障碍激活LPS-TLR4信号通路在2型糖尿病相关微量白蛋白尿的发生发展中的作用。 方法:选取2016年12月至2017年6月在甘肃省人民医院内分泌科住院的T2DM患者61例,依据尿白蛋白排泄率(urinary albumin excretion rate,UAER)进行分组,其中单纯T2DM组(UAER<20μg/min)32例,T2DM伴微量白蛋白尿组(UAER=20-200μg/min)29例,另外选取性别、年龄匹配的健康志愿者28例作为健康对照组。采用流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测PBMCs中TLR4表达水平;检测血清LPS、DLA、DAO、hs-CRP、IL-6及空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)、空腹胰岛素(fasting insulin,Fins)、糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin A1c,HbA1c)、肝肾功能等临床检验指标。所有数据采用国际商业机器公司(International Business Machine,IBM)研发的统计产品与服务解决方案软件(Statistical Product and Service Solutions,SPSS)第19.0版进行统计分析。 结果:1多组之间进行比较,与健康对照组相比,单纯T2DM组和T2DM伴微量白蛋白尿组的LPS、DLA、DAO、hs-CRP、IL-6和TLR4水平升高(P均<0.05),且T2DM伴微量白蛋白尿组的上述指标水平较单纯T2DM组更高(P均<0.05)。 2双变量相关分析提示,LPS水平与FBG、HbA1c、胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment of insulin resistance,HOMA-IR)、hs-CRP、IL-6、UAER、DLA、DAO、TLR4、年龄、病程呈正相关(r=0.420、0.372、0.380、0.281、0.248、0.556、0.594、0.663、0.251、0.242、0.480,P均<0.05),而与HDL呈负相关(r=-0.214,P<0.05);另外,TLR4水平与LPS、FBG、HbA1c、HOMA-IR、hs-CRP、UAER、DLA、病程呈正相关(r=0.251、0.229、0.224、0.231、0.272、0.291、0.220、0.334,P均<0.05)。 3在回归分析中,多元线性逐步回归分析结果显示血清TLR4水平(β=2.401,t=2.074,P=0.041)、LPS(β=0.041,t=2.651,P=0.010)、HbA1c(β=5.419,t=2.008,P=0.048)、hs-CRP(β=6.211,t=2.546,P=0.013)和DLA(β=-11.787,t=-3.010,P=0.004)与UAER的水平独立相关;Logistic回归分析结果提示血清FBG(OR=1.416,95%CI:1.046-1.917,P=0.024)、LPS(OR=1.011,95%CI:1.005-1.017,P=0.000)、TLR4(OR=1.253,95%CI:1.009-1.556,P=0.003)和hs-CRP(OR=1.986,95%C I:1.265-3.120,P=0.003)与T2DM伴发微量白蛋白尿独立相关。 结论:1血清中LPS、PBMCs中TLR4水平无论定量或定性分析,均与T2DM相关的微量白蛋白尿的发生发展独立相关;LPS和TLR4高表达可能是T2DM相关微量白蛋白尿出现的独立危险因素。 2LPS-TLR4信号通路(此通路激活常与肠道黏膜屏障功能受损密切相关)可能在2型糖尿病相关微量白蛋白尿的发生发展中起重要作用。