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土壤盐碱化严重影响作物生长和农业生产力,严重影响植物细胞渗透压调节、离子平衡、活性氧的清除等。植物可以通过识别外部信号产生相应的反应途径来对胁迫环境防御,锌指蛋白转录因子对植物应激反应的调节作用已被广泛报道。然而,关于C2HC型锌指蛋白在水稻响应碱性盐胁迫中的功能还知之甚少。本研究以前期实验室筛选到的表达序列标签为基础,经BLAST比对分析表明:与编码基因(登录号:AK068488)相似,其编码304个氨基酸,并经蛋白质保守结构在线网站分析获得:该基因编码C2HC型锌指蛋白,其分子量大小为33.6kDa,将其命名为OsZFP6。采用RT-PCR方法从水稻日本晴中克隆到该基因,分别经过Southern杂交以及表达特异性分析表明:OsZFP6基因在水稻基因组中,是以单拷贝形式存在;生殖期时,在根、茎、叶、叶鞘、穗中都有表达。同时,分别使用碱性盐(NaHCO3)和H2O2对水稻两周龄幼苗进行胁迫处理,检测到OsZFP6相对表达量受其诱导,并在叶和根中出现差异,因此,推测OsZFP6参与相应的逆境响应调节途径。为了检测其功能定位,我们将一个绿色荧光蛋白(GFP)与之融合,检测该融合蛋白的表达,在细胞核中发现了 GFP信号,表明OsZFP6在细胞核中发挥功能。此外,对过表达OsZFP6的拟南芥转基因植株分别进行NaHCO3和H2O2胁迫处理,结果表明过表达植株均具有较强的耐受性;并且在株高、鲜重生理指标上,野生型植株低于过表达OsZFP6植株,但在体内的MDA、H2O2含量测量中,出现相反的结果;同时,AtSOD1、AtAPX3、AtCAT1以及AtSOS1的相对表达量在经过胁迫处理后的过表达拟南芥中上调明显,说明OsZFP6可以通过参与调节抗氧化基因来清除活性氧,来增强植物的抗性。本研究又分析了水稻萌发后期NaHCO3胁迫的耐受性分析,过表达OsZFP6水稻耐受NaHCO3胁迫损伤能力高于野生型植株;过表达OsZFP6水稻生长的生理指标优于野生型植株。初步推测OsZFP6基因参与响应碱性盐胁迫途径的调控,可能在转录调控中直接或间接发挥重要作用。总之,我们揭示了OsZFP 能参与碱性盐和H2O2胁迫应答,对增强作物耐碱性起着重要作用。