不同脂肪酸对人中性粒细胞免疫功能的影响

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背景和目的:在过去的几十年中,肠外营养的应用大大改善了重症病人的营养状况。但是随之而来的感染并发症的增加成为肠外营养不得不面对的问题。有研究表明,排除其他干扰因素,肠外营养中的脂质成分潜在的免疫抑制作用与这种感染并发症的增加有着密切的联系。目前临床最常用的脂肪乳剂有:富含ω-6 PUFA的大豆油脂肪乳剂;将50%LCT和50%MCT物理混合而成的中/长链脂肪乳剂;以及富含ω-9 MUFA的橄榄油脂肪乳剂。本研究的目的是比较这三种不同脂肪酸对机体免疫功能的影响。作为宿主抵抗感染的主要防御细胞,中性粒细胞具有趋化、吞噬、产生氧自由基及释放作用等生物学特性。在完成其功能过程中涉及到细胞生物学、免疫学、生理学、病理生理学等诸多方面,受影响因素多种多样。研究肠外营养病人的感染类型发现,免疫抑制作用主要表现为对中性粒细胞功能的抑制。目前,有关不同脂肪酸对中性粒细胞免疫功能的抑制影响尚缺乏数据支持,理解亦十分有限,尤其在国内,更加缺乏相关数据和研究。本研究针对目前临床使用较为普及的三种不同脂肪酸构成的脂肪乳剂:Intralipid (LCT)、Kalu (LCT/MCT)及ClinOleic (LCT/MUFA),旨在考察三者在体外对人外周血中性粒细胞免疫功能的影响,包括趋化性、吞噬功能和氧自由基产生情况,以期了解不同成分脂肪酸对人体细胞免疫功能影响的差异,为临床工作提供参考。材料与方法:抽取15例健康志愿者外周静脉血各50mL,肝素抗凝,利用密度梯度离心法和淋巴细胞分离液分离出中性粒细胞(PMN),置于含10%胎牛血清的RPMI-1640培养液中,分别加入上述三种脂肪乳剂,每种脂肪乳剂设置5种浓度(0%、0.01%、0.1%、1%、10%),共同培养24小时。利用PMN吞噬酵母菌的方法测定其吞噬功能;利用琼脂糖平板实验测定PMN的趋化功能;利用NBT还原实验测定PMN氧呼吸爆发时氧自由基的产生情况。结果:1.随着浓度的增加,LCT组和LCT/MCT组PMN的吞噬功能明显下降,0.1%、1%和10%三组下降的程度与0%组相比均有统计学差异(全部P<0.051。而LCT/MUFA组的下降程度小于前两组,差别有统计学意义(LCT/MUFA Vs LCT, P0.1%=0.031, P1%=0.004, P10%<0.001; LCT/MUFA Vs LCT/MCT, P0.1%=0.016, P1%=0.013, P10%<0.001).2. LCT组、LCT/MCT组和LCT/MUFA组均能明显抑制各组PMN的NBT值,脂肪乳剂的浓度越高,各组NBT值下降越明显,并且二者呈负线性相关(b=-1.28,P<0.01)。三组间比较未见显著性差异。3.随着浓度的增加,LCT组和LCT/MCT组PMN的趋化功能明显下降,当浓度达到10%时,上述两组对PMN趋化抑制率达到30%左右,而LCT/MUFA组则不到10%(P1=0.005,P2=0.007)。结论:在体外培养的环境下,三种不同脂肪酸构成的脂肪乳剂均对人外周血中性粒细胞的各项免疫功能(吞噬功能、趋化功能、氧呼吸爆发产生氧自由基)具有抑制作用。脂肪乳剂的培养浓度越高,抑制作用越明显。LCT组和LCT/MCT组对各项免疫指标的抑制作用比LCT/MUFA组更加显著。
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