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目的:肿瘤微环境（tumor microenvironment,TME）中糖的异常组成有助于肿瘤的进展和转移。软骨素聚合因子（chondroitin polymerizing factor,CHPF）是一种新发现的糖基转移酶,主要功能为催化硫酸软骨素（chondroitin Sulfate,CS）的生物合成,而硫酸软骨素是细胞外基质（Extracellular matrix,ECM）的必要成分。转化生长因子β（transforming growth factor-beta,TGF-β）为分泌型细胞因子的一类,可引起广泛的细胞反应。已有研究表明在髓核细胞中TGF-β可通过激活JNK或者Smad3来调控CHPF的表达,但在乳腺肿瘤细胞中未见此信号通路的报道。因而,为了探索此信号通路在肿瘤细胞的作用机制,本课题研究了CHPF,TGF-β1在乳腺癌中的表达与患者临床病理特征和预后的关系,以及两者之间存在的调控通道,将给乳腺癌的诊疗提供新的靶点。方法:（1）Oncomine、Timer及Prognoscan数据库被用来分析CHPF在乳腺癌中的表达及其与患者预后的关系。（2）免疫组织化学染色被用来分析CHPF,TGF-β1在乳腺癌中的表达与患者临床病理特征和预后及相关性的关系。（3）通过Western blot进行CHPF内源性含量检测,之后分别对人MDA-MB-231和T47D细胞系进行CHPF过表达和敲除,并用Western Blot做转染效率鉴定。（4）通过CCK8法检测过表达CHPF组、敲除CHPF组及加入外源性TGF-β1重组蛋白组（10 ng/m L）相对于对照组的细胞增殖能力变化（24 h,48 h,72 h）。（5）通过划痕试验检测过表达CHPF组、敲除CHPF组及加入外源性TGF-β1重组蛋白组（10 ng/m L）与各相应对照组的细胞迁移能力变化（24 h）。（6）使用Transwell试验检测过表达CHPF组、敲除CHPF组及单加入外源性TGF-β1重组蛋白组（10 ng/m L）后与各相应对照组的细胞迁移及侵袭能力的变化（24 h）。（7）通过Western blot检测加入外源性TGF-β1重组蛋白（10 ng/m L）与对照组的蛋白表达水平变化（24 h）。检测过表达CHPF组、敲除CHPF组与其相应对照组的蛋白表达水平变化。检测单加入SP600125（JNK磷酸化抑制剂,10μM）、SIS3（Smad3磷酸化抑制剂,10μM）及再加入外源性TGF-β1重组蛋白后与空白对照的细胞蛋白表达水平变化（24 h）。（8）使用CCK8和Transwell检测在加入TGF-β1（10 ng/m L）和过表达CHPF基础上,再加入SP600125（JNK磷酸化抑制剂,10μM）或SIS3（Smad3磷酸化抑制剂,10μM）后与相应对照相比MDA-MB-231细胞增殖,侵袭和迁移能力的变化（24h）。结果:（1）Oncomine及Timer数据库分析显示乳腺肿瘤组织中CHPF的表达高于癌旁组织;Prognoscan数据库显示CHPF表达的高低与乳腺癌患者预后相关,CHPF表达高,则往往预后差。（2）免疫组织化学染色揭示CHPF,TGF-β1在乳腺癌中表达水平高于相应的癌旁组织。CHPF的表达高低与肿瘤直径大小、有无转移、临床分期和HER-2表达相关（P＜0.05）。而且CHPF与TGF-β1在乳腺癌中的表达呈正相关（r=0.7125,P＜0.05）。（3）Western blot检测CHPF在MDA-MB-231细胞系中的表达低于T47D细胞系,且鉴定过表达CHPF的人MDA-MB-231细胞系和敲除CHPF的人T47D细胞系均构建成功,结果显示两者相较于其对照组的CHPF蛋白含量变化了约70%（P＜0.05）。（4）过表达CHPF和加入TGF-β1重组蛋白（10 ng/m L）的乳腺癌细胞增殖能力增加（P＜0.05）;敲除CHPF的乳腺癌细胞增殖能力下降（P＜0.05）。（5）划痕试验中,过表达CHPF和加入TGF-β1重组蛋白（10 ng/m L）的乳腺癌细胞迁移能力增高（P＜0.05）;敲除CHPF的乳腺癌细胞迁移能力降低（P＜0.05）。（6）Transwell试验提示过表达CHPF和加入TGF-β1重组蛋白（10 ng/m L）的乳腺癌细胞迁移和侵袭能力增高（P＜0.05）;敲除CHPF的乳腺癌细胞迁移和侵袭能力降低（P＜0.05）。（7）乳腺癌细胞加入TGF-β1重组蛋白后导致p-JNK/JNK,p-Smad3/Smad3和CHPF表达量升高（P＜0.05）。过表达和敲除CHPF蛋白对上述蛋白表达无影响。但加入SP600125（JNK磷酸化抑制剂）或者SIS3（Smad3磷酸化抑制剂）后会逆转TGF-β1重组蛋白在乳腺癌细胞的作用（P＜0.05）。（8）在加入TGF-β1和过表达CHPF的乳腺癌细胞（MDA-MB-231）中加入SP600125（JNK磷酸化抑制剂）或者SIS3（Smad3磷酸化抑制剂）会部分逆转加入TGF-β1和过表达CHPF的导致的细胞增殖,迁移和侵袭能力的升高（P＜0.05）。结论:（1）CHPF在乳腺癌组织中表达较癌旁组织增高,CHPF高表达可能预示着预后不良,且其表达的高低与肿瘤直径、淋巴结转移、临床分期和HER-2表达相关。（2）CHPF在乳腺癌组织中的表达与TGF-β1的表达呈正相关。（3）CHPF能提高乳腺肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力。（4）CHPF在乳腺癌中的表达可能受到TGF-β1/JNK或者TGF-β1/Smad3调控。（5）TGF-β1可通过激活JNK或者Smad3调控CHPF的表达来影响乳腺肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力。