粉红螺旋聚孢霉多型性及分子系统学研究

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通过显微镜观察清楚显示了粉红螺旋聚孢霉(Clonastachys rosea)两种类型的产孢结构,即帚状分生孢子梗和轮枝状分生孢子梗;同时将两种类型的产孢结构上的分生孢子做了单孢子分离、对各单孢株作了培养特征观察和形态学观察;并通过多次传代确定其多型性的遗传稳定性.结果表明,两种类型的产孢结构是该种特有的形态结构,可以与其它相似种区别,多型性产孢结构能稳定遗传.通过考察粉红螺旋聚孢霉在不同培养温度、pH、碳源、氮源、光照、真菌抑制剂及对线虫固定能力等的生物学特性的研究,结果表明,不同来源菌株的培养形态有所差异;培养基pH2.5时,仅能形成少量的分生孢子梗,所形成的分生孢子梗均为轮枝状结构,轮枝状分枝与分生孢子形态大小正常,培养基pH>3.0时,均能形成两种产孢结构,形态大小正常,pH值的高低只影响菌株的生长速度,而不影响产孢结构的类型;不同条件的温度、碳源、氮源及光照只影响该菌的生长速度和产孢结构数量而不影响产孢结构的类型.从加有真菌抑制剂TBZ(Thiabendazole)的平板上得到一株只形成轮枝状分生孢子梗的突变株,说明TBZ可能能够诱发粉红螺旋聚孢霉发生形态突变;测定各原始菌株及突变株对线虫的固定能力,表明突变株的固定率远远低于原始菌株的固定率.用RAPD方法没有检测到野生株和只形成轮枝状分生孢子梗的突变株的遗传学差异,原因可能是突变没有发生在DNA水平,也有可能是由于RAPD技术没有检测到突变位点.用RAPD技术分析15株粉红螺旋聚孢霉的种内多态性,结果表明:RAPD谱带呈多态性,用UPMGA聚类分析表明该种各菌株间的遗传相似系数差异较大,从聚类图上可以表明粉红螺旋聚孢霉的种内遗传分化与形态特征密切相关,地理环境和分离基质对遗传分化有一定影响.在RAPD分析的基础上,利用ITS序列分析的结果也表明粉红螺旋聚孢霉种内分化关系是多元的;同时利用ITS序列分析该菌与其它相关属的亲缘关系,结果表明:粉红螺旋聚孢霉在系统树上是独立的分枝,可以作为一个独立的种存在,该菌与聚端孢属的亲缘关系较近,而与拟青霉和轮枝菌属的遗传关系较远;聚端孢属与轮枝菌、木霉、及拟青霉属是可以区分的属.
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