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第一部分血管性认知功能障碍模型血脑屏障改变与MMP-9表达的实验研究目的:观察慢性脑低灌注大鼠血管性认知功能障碍模型血脑屏障改变与MMP-9表达,并探讨它们在血管性认知功能障碍形成中的作用。方法:雄性SD大鼠,随机分成2组(模型组,正常对照组) ,模型组鼠行双侧颈总动脉分期永久结扎制备慢性脑低灌注大鼠血管性认知功能障碍模型,正常对照组鼠分离出颈总动脉后不予结扎即缝合皮肤。分别采用HE染色法、银染色法、辣根过氧化物酶( HRP )染色法及免疫组织化学染色法观察模型组和正常对照组各个时间点( 3 h、24 h、48 h、3 d、1 w和2 w )海马区锥体细胞、神经纤维、血脑屏障的变化及脑组织MMP-9的表达。结果:与正常对照组相比,模型组鼠从制模3 h起即开始出现HRP的反应产物和MMP-9的表达,随着脑低灌注时间的延长,其表达量逐渐增加,至第3 d时表达最明显,1 w时开始下降;海马区锥体细胞从3 h起即开始变性、固缩、坏死,随着脑低灌注时间的延长,海马区完整的细胞逐渐减少;海马区的神经纤维在脑缺血1w时大多数轴突断裂,2 w时轴突基本消失。结论:慢性脑低灌注大鼠模型认知功能障碍发生的过程中,血脑屏障破坏,海马区锥体细胞和神经纤维受损,与MMP-9表达增高有关。第二部分MMP-9在血管性认知功能障碍大鼠模型血脑屏障损坏中的作用目的:进一步确定慢性脑低灌注大鼠血管性认知功能障碍模型血脑屏障的损坏与MMP-9的关系,及MMP-9在血管性认知功能障碍形成中的作用。方法:雄性SD大鼠,随机分成3组(模型组,抑制剂组,正常对照组) ,模型组鼠行双侧颈总动脉分期永久结扎制备慢性脑低灌注大鼠模型,抑制剂组鼠在行双侧颈总动脉分期永久结扎前一天起每日腹腔注射MMPs抑制剂巴马司他( BB-94 ) ,正常对照组鼠分离出颈总动脉后不予结扎即缝合皮肤。采用HE染色法、辣根过氧化物酶( HRP )染色法及免疫组织化学染色法观察模型组、抑制剂组及正常对照组鼠手术3天后海马区锥体细胞、血脑屏障的变化及脑组织MMP-9的表达。采用Morris水迷宫实验观察各组鼠手术1月后认知功能的改变。结果:与模型组相比,抑制剂组鼠HRP反应产物和海马区锥体细胞受损明显减少,学习记忆功能明显改善( P<0.05 )。与正常对照组相比,抑制剂组鼠HRP反应产物、海马区锥体细胞及学习记忆功能无明显差异( P>0.05 )。结论:慢性脑低灌注大鼠模型认知功能障碍形成的过程中,MMP-9表达增高,通过破坏血脑屏障,促进海马区锥体细胞及神经纤维的损害,从而促进认知功能障碍的发生。早期使用MMPs抑制剂,可以保护血脑屏障,阻止认知功能障碍的发展。