目的:心功能恢复被认为是评估心肌缺血再灌注损伤（myocardium ischemia reperfusion injury,MIRI）的指标之一,而Ca²⁺是细胞内激发兴奋-收缩耦联使心脏产生收缩舒张的重要离子。心肌的钙运作失调导致的钙超载是促使细胞损害的“最后共同通路”。丹参注射液在本实验室前期的研究中被发现具有抗心肌缺血损伤的作用。本论文拟从心肌的钙运作调节切入探索其主要水溶性成分丹参素钠（Danshensu,DSS）防治缺血再灌注心功能障碍的机制。方法:1.离体心脏水平:采用langendorff灌注技术构建缺血再灌注损伤（I/R）模型并观察DSS对离体I/R大鼠心功能的影响。将SD大鼠随机分为control、I/R、I/R+极低剂量DSS、I/R+低剂量DSS、I/R+中剂量DSS、I/R+高剂量DSS、I/R+Rya（Ry R2通道调节剂）、I/R+中剂量DSS+Rya组,全程记录各项心功能指标:心率（HR）、左心室收缩峰压（LVPSP）、左心室舒张期末压（LVEDP）、左心室收缩期压力最大上升速率（+dp/dtmax）、左心室舒张期压力最大下降速率（-dp/dtmax）和缺血前后任意2min内的冠脉流量（CF）,并计算出左室发展压（LVDP=LVPSP-LVEDP）;实验结束后取心尖部位,透射电镜观察;取左心室肌采用ELISA方法观察大鼠心肌组织SERCA2a蛋白活性的变化;采用western blot方法观大鼠心肌组织主要钙转运蛋白（SERCA2a、NCX）以及其相关蛋白PLB、p-PLB（S16）、p-PLB（T17）、PKA含量表达的变化。2.细胞水平:酶解法急性分离大鼠心室肌细胞,药物灌流建立缺血再灌注损伤（I/R）细胞模型。使用激光共聚焦观察control组、I/R组、DSS组、Rya组、DSS+KB-R7493（NCX抑制剂）组以及KN-93（Ca MKⅡ抑制剂）组自身缺血前和再灌注后的电刺激诱导的钙瞬变以及control组、control+DSS组、control+Rya组、I/R组、I/R+DSS组、I/R+Rya组、I/R+DSS+KB-R7493组、I/R+KN-93组咖啡因诱导的钙瞬变。结果:1.离体心脏水平:观察到丹参素钠对正常心脏的心功能无影响,增加缺血再灌注后LVPSP（P<0.001）、LVEDP（P<0.001）以及LVDP（P<0.001）,明显降低心肌超微结构SR扩张的现象,改善缺血再灌注后心脏舒缩功能。缺血再灌注损伤使SERCA2a的表达量和活性降低（P<0.05）;升高T-PLB、p-PLB（T17）和PKA表达（P<0.05）。丹参素钠可使缺血再灌注后SERCA2a的表达量和活性恢复（P<0.05）,升高p-PLB（S16）表达（P<0.05）。2.细胞水平:电刺激诱导的钙瞬变结果显示缺血再灌注后心肌细胞钙瞬变幅度（△F/F₀）明显降低（P<0.01）、达峰时间（TP）延长（P<0.01）;丹参素钠使缺血再灌注后电刺激诱导的钙瞬变的衰变(T₅₀)加快（P<0.05）。咖啡因诱导的钙瞬变结果显示缺血再灌注后心肌细胞钙瞬变幅度（△F/F₀）降低（P<0.001）以及钙瞬变的衰变(T₅₀)延长（P<0.05）;丹参素钠使缺血再灌注后心肌细胞钙瞬变幅度（△F/F₀）升高（P<0.05）以及钙瞬变的衰变(T₅₀)缩短（P<0.05）。结论:DSS可通过增加SERC A2a的表达及活性,升高p-PLB（S16）的磷酸化,使Ca²⁺回摄增多,从而改善MIRI导致的心功能损伤;另外,DSS也可通过调节心肌细胞的钙运作,增强兴奋收缩耦联,改善MIRI心脏舒缩功能。