新型大鼠失血性休克模型的建立及休克性肝炎发生机制初探

来源 :河北农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:adroithy
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失血性休克(Hemorrhagic shock,HS)是一种外科常见的急危重症,目前人们对于失血性休克的认识大部分来源于动物实验,所以建立一个标准化的动物模型至关重要。本研究根据液压原理,用注射器设计的储血器血库装置构建了一种自动化出血模式的新型大鼠失血性休克模型,并通过监测各组平均动脉压(Mean arterial pressure,MAP)、血压和心率、失血量、死亡率、动脉血气分析及海马神经元病理学损伤指标评价该模型;在此模型建立的基础上,通过组织病理学染色观察肝小叶坏死,检测肝功能传统的生化指标变化,检测肝组织能量代谢指标ATP的含量和线粒体损伤指标线粒体膜电位(Mitochondrial membrane potential,MMP)变化,对失血休克后相关肝脏损伤-休克性肝炎的发生与潜在机制进行初步探究。主要研究结果如下:1.用注射器血库建立的大鼠失血性休克模型,可维持长时间的稳定低血压,能引起严重乳酸酸中毒。MAP可准确地维持在31-35 mm Hg左右,休克时间至少可维持3 h;乳酸含量在休克结束和复苏后显著升高(P<0.05);最大失血量及最终失血量数值非常相似,可达到总循环血量的60%,属于重度失血性休克;2.用注射器血库建立的大鼠失血性休克模型,能引起可靠的组织损伤,并且该模型是可救治的。在大脑HE病理染色切片中观察到休克和复苏后均出现固缩的海马神经元;在经历休克3 h后,未复苏处理组(RN组)所有大鼠均在2 h内死去,复苏处理(自身血液复苏RB组和乳酸林格氏液复苏RR 组)的大鼠在3 h内均可存活;3.休克性肝炎发生在组织恢复灌注之后。HE染色结果显示,单纯休克3 h的HS组细胞水肿、空泡变性,未见坏死;复苏处理的两组,肝细胞肿胀,肝窦变窄或消失,胞浆变红,组织细胞大片坏死;肝功能检测结果显示HS组胆功能指标虽有升高趋势,但差异不显著(P>0.05);复苏处理(RB组和RR组)谷内转氨酶(ALT)与谷草转氨酶(AST)水平显著升高(P<0.05),是正常状态水平的4倍以上,RR组乳酸脱氢酶(LDH)水平极显著升高(P<0.01),约是正常值的10倍;各组苹果酸脱氢酶(MDH)水平变化与LDH水平变化极其相似,其RR组水平也升高为正常值的10倍左右;4.休克性肝炎的发生伴有严重细胞能量代谢障碍和线粒体损伤。休克3 h后肝细胞ATP含量极显著下降(P<0.0001),复苏后虽有显著回升(P<0.05),但仍远远低于正常时的水平;与Sham组相比,MMP在休克后出现显著降低(P<0.05),其中RB组比值降低极显著(P<0.001);复苏后的RB组红绿荧光比值显著降低(P<0.05),RR组比值略有下降,差异不显著(P>0.05);与RB组相比,RR组比值略有升高,但不具有统计学意义(P>0.05)。
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