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本课题包括两个部分:(1)MMP-2,-14及相关因子与颈动脉粥样斑块易损性的研究;(2)颈动脉易损斑块与缺血性卒中的相关性研究。第一部分MMP-2,-14及相关因子与颈动脉粥样斑块易损性的研究目的研究基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2),MMP-14及相关因子与颈动脉粥样斑块易损性的关系,探讨影响斑块稳定性的相关因素。方法1.临床资料:2015年1月至2016年6月在苏州大学附属第一医院神经外科行颈动脉内膜剥脱术(endarterectomy,CEA)患者55例,其中男50例,女5例。术前根据基于颈部血管超声(carotid doppler ultrasonography,CDU)的多模式影像学检查、术后粥样斑块HE染色特征,将粥样斑块组织分为稳定斑块组23例及易损斑块组32例。2.应用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,Real-time PCR)及蛋白免疫印迹(western blotting,WB)方法定量分析基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和骨相关因子骨唾液酸蛋白(bone sialo protein,BSP)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)在稳定斑块组和易损斑块组中表达水平的差异。3.应用免疫组织化学法定位分析MMP-2及MMP-14在稳定斑块组及易损斑块组中表达的分布差异。结果1.MMPs各因子在易损斑块组m RNA表达水平较稳定斑块组几乎均升高,其中MMP-2,-7,-9,-14的m RNA表达水平在两组间差异具有统计学意义(P<0.05),且MMP-2,-9,-14的m RNA表达差异更显著(P<0.001)。2.MMP-2,MMP-14,VEGF,BSP在易损斑块组中蛋白表达水平高于稳定斑块组,差异具有统计学意义(P<0.05),而OPN在易损斑块组的表达水平低于稳定斑块组,差异具有统计学意义(P<0.05)。3.免疫组化结果显示MMP-2,MMP-14在易损斑块组中分布水平明显高于稳定斑块组,且在溃疡型斑块,斑块纤维帽破裂等处分布较高。结论1.MMP-2和MMP-14 m RNA及蛋白表达水平与颈动脉易损斑块存在显著相关性,是影响斑块易损性的重要因子。2.VEGF,血管钙化因子BSP及OPN的表达水平与颈动脉易损斑块具有相关性,表明新生血管和钙化是影响斑块稳定性的重要因素。第二部分颈动脉易损斑块与缺血性卒中的相关性研究目的分析颈动脉粥样斑块易损性与缺血性卒中的相关性,探讨准确评估易损斑块的临床意义。方法1.临床资料:2015年9月至2016年12月在苏州大学附属第一医院神经外科行CEA术患者64例,术前、术后均行基于颈部血管超声(CDU)的多模式影像学检查,根据术前6个月内是否首发缺血性卒中,分为缺血组及非缺血组;根据术前CDU检查、术后斑块大体形态及HE染色特征评估斑块性质,统计CEA术前病人临床表现及卒中高危因素等情况,并进行统计学分析。2.运用Χ2检验对患者进行卒中高危因素分析,并分析斑块性质与缺血性卒中的3.相关性,运用Kappa检验对术前CDU结果与术后相应层面病理结果进行一致性分析。结果1.短暂性脑缺血发作(transient ischemic attack,TIA)及卒中史在缺血组患者中的发生率较非缺血组高(P<0.05)。2.缺血组与非缺血组的斑块性质评估:缺血组44例,其中CDU评估易损斑块81.8%(36/44),稳定斑块18.2%(8/44);病理学评估易损斑块86.4%(38/44),稳定斑块13.6%(6/44);非缺血组20例,其中CDU评估易损斑块35%(7/20),稳定斑块65%(13/20);病理学评估易损斑块40%(8/20),稳定斑块60%(12/20)。3.斑块易损性与缺血性卒中的相关性分析:CDU评估缺血组易损斑块明显高于非缺血组(Χ2=13.67,P<0.001);病理学评估缺血组易损斑块明显高于非缺血组(Χ2=14.62,P<0.001)。CDU与病理学评估斑块易损性具有良好的一致性(Kappa=0.669,P<0.01)。结论1.颈动脉斑块易损性与缺血性卒中密切相关。2.CDU能准确评估斑块易损性,对于及早发现并“精准”治疗易损斑块、防止缺血性脑卒中具有重要的临床意义。