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目的评估广州市男男性行为者(men who have sex with men,MSM)鼻腔金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)的定植情况,探讨影响鼻腔定植的因素,分析菌株的耐药表型和分子特征,为预防控制MSM人群中金黄色葡萄球菌的流行和感染提供科学依据。方法根据横断面研究设计,采用方便抽样的方法在广州市的艾滋病自愿咨询检测门诊招募研究对象并进行问卷调查和鼻腔分泌物采样。通过一系列实验室标准方法分离鉴定金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(Methicillin-susceptible Staphylococcus aureus,MSSA);采用Kirby-Bauer纸片扩散法对菌株进行药物敏感性试验;采用PCR(Polymerase Chain Reaction)扩增技术检测菌株的特异性基因、耐药基因和毒素基因;通过多位点序列分型(Multilocus sequence typing,MLST)确定金葡菌的分子分型;采用全基因测序技术检测MRSA分子特征。金葡菌与MRSA的单因素分析采用c~2检验或Fisher确切概率法,P<0.10的变量纳入非条件Logistic回归模型进行多因素分析。耐药特征及分子特征各组间比较采用c~2检验或Fisher确切概率法。P<0.05(双侧)表示差异具有统计学意义。采用BURST算法与树状图分析软件(PHYLOVIZ 2.0,MEGA-X)比较菌株等位基因的进化关系并进行亲缘性分析。结果基本情况:共纳入911名MSM,年龄范围16-58周岁,平均年龄(±标准差)为27.70±3.38岁,未婚为主(91.55%),大专及以上学历占86.72%,大多数(86.50%)近半年有同性性行为。SA和MRSA的定植率及影响因素:SA、MRSA和MSSA的定植率分别为33.70%(307/911)、3.62%(33/911)和30.08%(274/911)。多因素分析结果显示,使用互联网/软件寻找同性性伴是MSM定植SA的危险因素(OR=1.574,95%CI:1.095-2.263);戒烟(OR=7.166,95%CI:1.662-30.895)是MRSA定植的危险因素。药物敏感性分析:MSM鼻腔金黄色葡萄球菌对青霉素、红霉素、呋喃妥因、替考拉宁的耐药率较高,对复方新诺明、庆大霉素耐药率较低,多重耐药率达49.51%。MRSA对青霉素、头孢西丁、红霉素、克林霉素、复方新诺明、莫西沙星的耐药率及高于MSSA,而对替考拉宁、利奈唑胺、呋喃妥因的耐药率低于多重耐药MSSA(P<0.05)。MRSA的多重耐药模式为头孢西丁-红霉素-克林霉素,MSSA的多重耐药模式为红霉素-替考拉宁-呋喃妥因。分子分型:金黄色葡萄球菌共有82种MLST型别,主要为ST188(13.03%)、ST15(9.45%)、ST7(7.49%)和ST398(7.17%)。MRSA共22种ST型别,主要为ST59(24.24%)和ST5(9.09%);SCCmec型别主要为IV型(39.39%),其次为V型(27.27%)、NT(24.24%),I型、II型和III型各一株(3.03%);SPA分型共14种,主要为t437(21.21%)、t164(6.06%)、t311(6.06%)、t1451(6.06%)和t4549(6.06%);MRSA主要的分子分型模式为t437-ST59-SCCmec IV(7株)。系统进化树显示有18组SA具有不同程度的亲缘性,存在医院、社区和动物来源菌株聚集的现象。SA的基因携带情况:结合MSSA的PCR检测结果和MRSA全基因测序结果,对SA的6种耐药基因和6种毒素基因进行分析。耐药基因主要为blaZ(68.08%)、erm(C)(34.85%)、tet(K)(26.38%),毒素基因主要为sak(92.83%)、scn(74.27%)。12.05%SA携带tst基因;2.93%SA携带pvl基因,3.58%SA携带etb基因,0.65%SA携带eta基因,且均为MSSA。MRSA的blaZ、mecA基因携带率高于MSSA,sak基因携带率低于MSSA(P<0.05)。单株ST15 SA携带较多耐药和毒素基因,ST188和ST1281 SA携带较多毒素基因。MRSA的基因携带情况:33株MRSA共筛选到7类19种耐药基因和6类26种毒素基因。耐药基因主要为blaZ(96.97%)、mecA(78.79%)、erm(C)(39.39%)、tet(K)(24.24%)和aph(3’’)-III(24.24%),毒素基因主要为aur(72.73%)、hlg A(69.70%)、hlgB(69.70%)、hlgC(69.70%)、scn(63.64%)和sak(60.61%)。单株ST59、ST874和ST5697 MRSA可携带8种耐药基因,单株ST5和ST25 MRSA可携带18种毒素基因。结论广州市MSM鼻腔金葡菌定植率处于中等水平,但MRSA定植率较高。使用互联网/软件寻找同性性伴是MSM鼻腔定植金葡菌的危险因素,吸烟习惯是MSM鼻腔定植MRSA的影响因素,已戒烟者比从未吸烟者定植MRSA风险高。MSM人群金葡菌多重耐药情况较严重,今后需对抗菌药物耐药水平进行长期动态的监测。金葡菌的ST型别以ST188为主,MRSA分子分型以t437-ST59-SCCmec IV为主,存在社区、医院和动物来源菌株交叉传播的风险。