树突状细胞与细胞因子诱导的杀伤细胞共培养对白血病耐药细胞杀伤作用的实验研究

来源 :兰州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:youngpansy
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目的 多药耐药的发生是白血病化疗失败的主要原因。本文旨在研究利用P-170糖蛋白(P-gp)高表达的多药耐药(MDR)白血病K562/A02细胞冻融抗原冲击的树突状细胞(DC)与同源细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)共培养,观察共培养细胞(K562/A02-DC-CIK、DC-CIK)的免疫表型的变化、增殖活性及其对多药耐药细胞株K562/A02杀伤作用的影响,证实以多药耐药为靶点的免疫治疗的可行性并探讨DC-CIK共育对免疫介导的肿瘤杀伤效应的影响。方法 提取健康人的骨髓单个核细胞(BMMNC),常规诱导出DC及CIK细胞,将P-gp高表达的多药耐药白血病K562/A02细胞冻融物作为抗原冲击的DC,与CIK细胞共培养作为实验组(K562/A02冻融物-DC-CIK组),抗原不冲击的DC与CIK细胞共培养作为对照组(DC-CIK组),以CIK及DC细胞单独培养分别作为空白对照组1和空白对照组2。光镜下观察细胞形态,应用流式细胞术分析细胞表型,MTT法检测K562/A02冻融物-DC-CIK,DC-CIK,CIK细胞对MDR白血病株K562/A02细胞、敏感株K562细胞及人乳腺癌细胞系MCF7细胞株的杀伤活性。结果 K562/A02冻融物-DC-CIK组、DC-CIK组细胞增殖活性均大于CIK组,差异有统计学意义(P<0.05)。K562/A02冻融物-DC-CIK组对K562/A02、K562细胞的杀伤活性在效靶比5:1、10:1、20:1时分别为(42.9±0.67)%、(49.85±0.28)%、(63.36±0.46)%和(23.56±0.43)%、(26.11±0.34)%、(34.46±0.35)%,均高于DC-CIK组及单纯CIK组,差异有统计学意义(P<0.05);K562/A02冻融物-DC-CIK组对K562/A02的杀伤活性高于K562和MCF7(P<0.05)。结论 DC与ClK共培养细胞是一种增殖活性和细胞毒活性高于CIK细胞的免疫活性细胞,而经多药耐药白血病K562/A02冻融抗原冲击的DC与CIK共培养能明显提高对MDR白血病株K562/A02细胞的杀伤活性。
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