【摘 要】
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老龄小鼠由于衰老导致生殖能力下降与多种因素相关,个体组织器官氧化应激水平上升是主要因素之一。氧化应激水平受到两方面的影响,一方面与组织器官氧化自由基水平相关,另一方面与抗氧化系统相关。从抗氧化系统来看,含硒酶在抗氧化酶系统中具有重要作用,但个体血硒水平随年龄上升而下降。本试验旨在探讨饲料中添加亚硒酸钠对缺硒老龄ICR小鼠生殖能力的影响。首先,老龄雌性ICR小鼠用缺硒饲料(0.08 mg·kg-1S
【基金项目】
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国家重点研发计划项目(2016YFD0501202);
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老龄小鼠由于衰老导致生殖能力下降与多种因素相关,个体组织器官氧化应激水平上升是主要因素之一。氧化应激水平受到两方面的影响,一方面与组织器官氧化自由基水平相关,另一方面与抗氧化系统相关。从抗氧化系统来看,含硒酶在抗氧化酶系统中具有重要作用,但个体血硒水平随年龄上升而下降。本试验旨在探讨饲料中添加亚硒酸钠对缺硒老龄ICR小鼠生殖能力的影响。首先,老龄雌性ICR小鼠用缺硒饲料(0.08 mg·kg-1Se)饲喂14d后随机分为三组:缺硒饲料(0.08 mg·kg-1Se)组和硒添加饲料组(0.15 mg·kg-1、0.33 mg·kg-1亚硒酸钠),用不同硒含量饲料饲喂42d。然后,检测血液中硒含量以及总抗氧化力;统计卵巢中:1)卵泡数量、2)GPX4蛋白表达、Selenoprotein K表达、3)组织细胞凋亡水平及4)抗氧化、凋亡、硒蛋白相关基因m RNA表达;分析小鼠超数排卵后所获卵母细胞的孤雌激活胚胎发育率。结果如下:(1)缺硒饲料饲喂14d后,硒添加饲料及缺硒饲料再连续饲喂42d,硒添加饲料组血液硒浓度、总抗氧化力显著高于缺硒饲料组(P<0.05)。(2)卵巢切片通过HE染色结果显示,0.33 mg·kg-1亚硒酸钠添加组原始卵泡数、初级卵泡数、次级卵泡数较缺硒组显著上升(P<0.05)。(3)卵母细胞经体外成熟及孤雌激活后,亚硒酸钠饲料添加组小鼠孤雌囊胚发育率显著上升(P<0.05),缺硒组无胚胎发育至孵化囊胚,0.33mg·kg-1亚硒酸钠饲料添加组孵化囊胚率较缺硒组显著上升(P<0.05)。(4)饲料中分别添加0.15 mg·kg-1、0.33 mg·kg-1亚硒酸钠饲喂42天后,0.33mg·kg-1亚硒酸钠添加组卵巢细胞凋亡水平显著低于(P<0.05)缺硒组和0.15mg·kg-1亚硒酸钠添加组。(5)硒添加饲料饲喂42天后,0.33 mg·kg-1亚硒酸钠添加组老龄ICR小鼠卵巢组织中硒蛋白K表达量较缺硒组显著升高(P<0.05)。亚硒酸钠添加组老龄ICR小鼠卵巢组织中GPX4蛋白表达较缺硒组显著升高(P<0.05)。(6)硒添加饲料饲喂42天后,0.33 mg·kg-1亚硒酸钠添加组卵巢组织中Gpx1、Gpx3、Gpx4 m RNA相对表达量显著上升(P<0.05);Selenof、Selenok、Selenom m RNA相对表达量亚硒酸钠添加组均显著上升(P<0.05),0.33 mg·kg-1亚硒酸钠添加组显著高于0.15 mg·kg-1亚硒酸钠添加组(P<0.05);Bcl-2基因表达量亚硒酸钠添加组均显著降低(P<0.05);p21 m RNA相对表达量0.33 mg·kg-1亚硒酸钠添加组显著降低(P<0.05)。综上所述,饲料中添加0.33 mg·kg-1亚硒酸钠饲喂缺硒老龄ICR小鼠,可有效缓解血硒水平下降,血液总抗氧化力上升,通过降低卵巢细胞凋亡水平(上调部分硒蛋白抗氧化基因、下调凋亡相关基因,促进硒蛋白K、GPX4蛋白表达),维持卵巢储备,促进卵泡发育,改善卵母细胞质量,提升发育潜力,进而改善老龄ICR鼠生殖能力。
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