目的构建组织蛋白酶D（cathepsinD，CD）基因稳定干扰的胰腺癌L3.6pl细胞系，研究CD基因沉默对L3.6pl细胞体外生物学行为的影响。　　方法构建CDshRNA慢病毒载体并感染胰腺癌L3.6pl细胞，筛选稳定细胞株，采用Real-timePCR及WesternBlot分别检测CDmRNA和蛋白表达水平，并与阴性对照和空白对照组L3.6pl比较。采用MTT法、Transwell小室及流式细胞学分别检测L3.6pl、NC-L3.6pl、KD-L3.6pl三组细胞细胞体外增殖、迁移和侵袭的能力及细胞周期和凋亡的情况。　　结果CD慢病毒载体感染L3.6pl后，Real-timePCR提示CDmRNA表达下降95.46％，WesternBlot显示CD蛋白表达较干扰前显著下降。KD-L3.6pl细胞的增殖和迁移能力较对照组均明显减弱，Matrigel侵袭能力较对照组无明显改变;抑制CD表达可诱导L3.6pl细胞周期发生再分布，G1期比例上升，S期和G2期比例下降，但对细胞凋亡无明显影响。　　结论成功构建CD稳定下调的L3.6pl细胞系。体外实验证实CD基因沉默可抑制L3.6pl细胞的有丝分裂和迁移能力。