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目的:正常颞下颌关节盘（temporomandibular joint disc,TMJ disc）处于低血低氧环境中,持续负荷会造成关节盘细胞营养和代谢障碍。目前低氧诱导因子-1α特异性抑制剂（Lificiguat,YC-1）和抗氧化剂在关节盘细胞能量代谢中的作用和调控机制尚不清楚。因此本研究利用化学低氧诱导剂氯化钴（cobalt chloride,Co Cl2）、2%O2物理低氧以及物理化学双重低氧模拟关节盘细胞的生理低氧环境,探讨YC-1和N-乙酰半胱氨酸（N-acetylcysteine,NAC）在低氧诱导的羊TMJ disc细胞能量代谢中的作用和调控机制。方法:羊TMJ disc原代细胞分离、提取、培养、传至P2代。1.Co Cl2建立羊TMJ disc细胞体外化学缺氧模型:用不同浓度（0、50、100、200、300、400、500、600、700μM）Co Cl2培养液培养羊TMJ disc细胞,通过CCK-8检测细胞增殖;RT-q PCR检测低氧诱导因子-1α（hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α）m RNA表达和DCFH-DA探针检测细胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）表达,确定后续实验Co Cl2浓度。2.低剂量YC-1在低氧诱导的羊TMJ disc细胞能量代谢中的影响:实验分组为21%O2组（对照组,YC-1组,Co Cl2组,Co Cl2+YC-1组）和2%O2组（对照组,YC-1组,Co Cl2组,Co Cl2+YC-1组）,分别检测细胞增殖、培养液上清中葡萄糖消耗量和乳酸生成量、细胞内三磷酸腺苷（adenosine triphosphate,ATP）生成量以及ROS表达和HIF-1α、葡萄糖转运蛋白1（glucose transporter 1,GLUT1）、乳酸脱氢酶A（lactate dehydrogenase A,LDHA）、丙酮酸激酶M2（pyruvate kinase M2,PKM2）和磷酸甘油酸激酶1（phosphoglycerate kinase 1,PGK1）m RNA表达。3.NAC在低氧诱导的羊TMJ disc细胞能量代谢中的影响:实验分组为21%O2组（对照组,NAC组,Co Cl2组,Co Cl2+NAC组）和2%O2组（对照组,NAC组,Co Cl2组,Co Cl2+NAC组）,分别检测细胞增殖、葡萄糖消耗量、乳酸生成量和ATP生成量以及ROS检测和HIF-1α、GLUT1、LDHA、PKM2和PGK1 m RNA表达水平。结果:1.Co Cl2抑制羊TMJ disc细胞增殖,当Co Cl2浓度≤200μM时,在24 h和48 h对细胞增殖无明显影响（P＞0.05）,当Co Cl2浓度≥300μM时,羊TMJ disc细胞增殖被抑制（P＜0.05）,抑制作用呈现时间和剂量依赖性;Co Cl2会降低HIF-1αm RNA的表达,这种抑制作用随Co Cl2浓度升高更加明显;Co Cl2会导致细胞内ROS表达增加,呈剂量依赖性。2.低剂量YC-1会抑制低氧下羊TMJ disc细胞增殖,抑制细胞培养液上清中葡萄糖消耗量和乳酸生成量（P＜0.05）,抑制细胞内ROS表达和ATP生成（P＜0.05）,同时抑制HIF-1α、GLUT1、LDHA、PKM2和PGK1 m RNA表达（P＜0.05）。3.5 m M NAC会促进低氧诱导的羊TMJ disc细胞增殖,Co Cl2组（21%O2）促进效果明显（P＜0.05）;促进低氧下细胞培养液上清中的葡萄糖消耗（P＞0.05）;显著降低低氧下培养液上清中乳酸生成（P＜0.01）;显著降低低氧下细胞内ROS表达（P＜0.001）;促进细胞内ATP生成（P＜0.05）;抑制HIF-1α、GLUT1、LDHA、PKM2、PGK1m RNA表达（P＜0.05）,对PGK1 m RNA抑制最显著。结论:1.300μM Co Cl2可以抑制羊TMJ disc细胞增殖,抑制HIF-1αm RNA表达,同时促进细胞内ROS表达,确定300μM Co Cl2可以用于Co Cl2诱导羊TMJ disc细胞低氧环境下氧化应激损伤的研究。2.低剂量YC-1通过抑制HIF-1α表达,抑制低氧下羊TMJ disc细胞糖酵解过程。3.NAC降低了羊TMJ disc细胞培养液上清中乳酸生成,抑制糖酵解关键酶表达,促进葡萄糖消耗和ATP产生,可能使羊TMJ disc细胞能量代谢向氧化磷酸化转变,NAC可能成为颞下颌关节盘类疾病和颞下颌关节紊乱病潜在的临床治疗靶点。