低剂量YC-1和NAC在低氧诱导的羊颞下颌关节盘细胞能量代谢中的作用机理研究

来源 :兰州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:x3191929
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:正常颞下颌关节盘(temporomandibular joint disc,TMJ disc)处于低血低氧环境中,持续负荷会造成关节盘细胞营养和代谢障碍。目前低氧诱导因子-1α特异性抑制剂(Lificiguat,YC-1)和抗氧化剂在关节盘细胞能量代谢中的作用和调控机制尚不清楚。因此本研究利用化学低氧诱导剂氯化钴(cobalt chloride,Co Cl2)、2%O2物理低氧以及物理化学双重低氧模拟关节盘细胞的生理低氧环境,探讨YC-1和N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)在低氧诱导的羊TMJ disc细胞能量代谢中的作用和调控机制。方法:羊TMJ disc原代细胞分离、提取、培养、传至P2代。1.Co Cl2建立羊TMJ disc细胞体外化学缺氧模型:用不同浓度(0、50、100、200、300、400、500、600、700μM)Co Cl2培养液培养羊TMJ disc细胞,通过CCK-8检测细胞增殖;RT-q PCR检测低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)m RNA表达和DCFH-DA探针检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)表达,确定后续实验Co Cl2浓度。2.低剂量YC-1在低氧诱导的羊TMJ disc细胞能量代谢中的影响:实验分组为21%O2组(对照组,YC-1组,Co Cl2组,Co Cl2+YC-1组)和2%O2组(对照组,YC-1组,Co Cl2组,Co Cl2+YC-1组),分别检测细胞增殖、培养液上清中葡萄糖消耗量和乳酸生成量、细胞内三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)生成量以及ROS表达和HIF-1α、葡萄糖转运蛋白1(glucose transporter 1,GLUT1)、乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase A,LDHA)、丙酮酸激酶M2(pyruvate kinase M2,PKM2)和磷酸甘油酸激酶1(phosphoglycerate kinase 1,PGK1)m RNA表达。3.NAC在低氧诱导的羊TMJ disc细胞能量代谢中的影响:实验分组为21%O2组(对照组,NAC组,Co Cl2组,Co Cl2+NAC组)和2%O2组(对照组,NAC组,Co Cl2组,Co Cl2+NAC组),分别检测细胞增殖、葡萄糖消耗量、乳酸生成量和ATP生成量以及ROS检测和HIF-1α、GLUT1、LDHA、PKM2和PGK1 m RNA表达水平。结果:1.Co Cl2抑制羊TMJ disc细胞增殖,当Co Cl2浓度≤200μM时,在24 h和48 h对细胞增殖无明显影响(P>0.05),当Co Cl2浓度≥300μM时,羊TMJ disc细胞增殖被抑制(P<0.05),抑制作用呈现时间和剂量依赖性;Co Cl2会降低HIF-1αm RNA的表达,这种抑制作用随Co Cl2浓度升高更加明显;Co Cl2会导致细胞内ROS表达增加,呈剂量依赖性。2.低剂量YC-1会抑制低氧下羊TMJ disc细胞增殖,抑制细胞培养液上清中葡萄糖消耗量和乳酸生成量(P<0.05),抑制细胞内ROS表达和ATP生成(P<0.05),同时抑制HIF-1α、GLUT1、LDHA、PKM2和PGK1 m RNA表达(P<0.05)。3.5 m M NAC会促进低氧诱导的羊TMJ disc细胞增殖,Co Cl2组(21%O2)促进效果明显(P<0.05);促进低氧下细胞培养液上清中的葡萄糖消耗(P>0.05);显著降低低氧下培养液上清中乳酸生成(P<0.01);显著降低低氧下细胞内ROS表达(P<0.001);促进细胞内ATP生成(P<0.05);抑制HIF-1α、GLUT1、LDHA、PKM2、PGK1m RNA表达(P<0.05),对PGK1 m RNA抑制最显著。结论:1.300μM Co Cl2可以抑制羊TMJ disc细胞增殖,抑制HIF-1αm RNA表达,同时促进细胞内ROS表达,确定300μM Co Cl2可以用于Co Cl2诱导羊TMJ disc细胞低氧环境下氧化应激损伤的研究。2.低剂量YC-1通过抑制HIF-1α表达,抑制低氧下羊TMJ disc细胞糖酵解过程。3.NAC降低了羊TMJ disc细胞培养液上清中乳酸生成,抑制糖酵解关键酶表达,促进葡萄糖消耗和ATP产生,可能使羊TMJ disc细胞能量代谢向氧化磷酸化转变,NAC可能成为颞下颌关节盘类疾病和颞下颌关节紊乱病潜在的临床治疗靶点。
其他文献
<正>由Kokaistudios执笔设计的中信泰富广场改造项目现已落成,该项目成为上海内在二元性的缩影。结合了多媒体元素和未来主义美学,并入驻了多个时下最受欢迎的品牌,它与这座城市中历史悠久且保存最完好的传统示范性的巷道住宅无缝衔接。位于静安区精华段的南京西路上,中信泰富广场的立面改造设计灵感来源于“像素”,设计以精心拣选的材料打破了商业固有的“方盒子”造型,更模糊了城市环境与商业空间、公共与私属
期刊
针对航空发动机推力剪切销连接结构,设计了一种包含测试板和系数矩阵的剪切销载荷测量新方法和试验装置。测试板包含多短梁结构,以此为基础构建应变计布局和组桥方式,建立了双剪切销载荷测试的标定方法及试验验证装置,通过试验验证了采用此方法进行超静定剪切销连接结构载荷标定及测试的可行性。试验结果表明:两个剪切销承载载荷测试结果在较大载荷阶段的测试偏差明显减小,在50~200 kN范围内,剪切销载荷测试偏差≤1
目的 构建维持性血液透析患者营养不良风险评估图并评价预测效能。方法 便利选取成都市6所血液净化中心1 355例维持性血液透析患者,根据控制营养状态评分分为营养正常组(n=1 030)和营养不良组(n=325),并回顾性收集营养状况评估前1个月营养相关影响因素。采用logistic回归分析确定独立危险因素,应用R 4.1.2软件划分营养不良风险等级节点并绘制风险评估图,使用Bootstrap自助抽样
随着社会的发展前进,社会经济发展水平也在不断提高,其中国民经济构成中,国有企业更加重要,因此对于国有企业来说,建立与时代发展相适应的管理模式尤为重要。而国有企业的经营管理中,绩效管理精细化模式的应用对国有企业的发展有着决定性的因素。精细化管理作为一种先进的管理理念和方式,其实施对国有企业的发展起到关键性的推动作用,不仅可以进一步精确发现国有企业当前存在的问题,还可以提升绩效管理工作的操作性和实时性
研究背景及目的特应性皮炎(atopic dermatitis,AD)是一种慢性、复发性、炎症性皮肤病,其临床表现多样,以反复出现湿疹皮损为特征,患者常伴有剧烈瘙痒。近年来,AD在中国的发病率逐年上升。目前认为,AD的发病与皮肤屏障功能障碍、免疫失调、皮肤菌群紊乱、遗传背景以及环境因素等有关。单细胞转录组测序(single-cell RNA-sequencing,sc RNA-seq)是指基于二代测
介绍了出口苏丹的某型动车组动车车体的设计,并利用ANSYS CFX软件对动车车体风道进行流量分配均匀性仿真分析,利用ANSYS软件对车体的静强度、疲劳强度和刚度进行了有限元计算分析,并据此对相关结构进行了改进。
建筑业作为我国的支柱产业之一,在国民经济中发挥着重要作用,但目前我国的工程质量问题仍十分突出。建设工程质量问题不仅关系到工程的适用性,还会影响人们的人身财产安全和社会稳定,学术界对加强建设工程质量管理尤为关注。但当前传统的施工质量检查主要依靠检测人员现场检测和记录,存在效率低、漏检率大、主观性强、实时性差等问题。同时施工质量问题的防治所需知识多,范围广,人脑难以完全掌握,很难实现有针对性的预防及治
<正> 陕西蓝田地区的新生代地层保存得非常完好,各个时代的地层,几乎都有其代表,并发现了丰富的哺乳动物化石。在第四纪地层中,特别具有意义的是公王岭及陈家窝分别发现了蓝田人头盖骨及下颌骨,一些地区还发现了旧石器,更进一步证实这一地区在第四
期刊