本文以椰衣纤维为原料,经酸碱处理、高碘酸钠氧化后,利用共价结合法制备椰衣纤维固定化木聚糖酶,并直接用于水解椰壳木聚糖,探究该固定化木聚糖酶催化水解木聚糖的反应机理并进行动力学分析。采用氢氧化钠溶液从椰衣纤维中提取半纤维素,并对其结构进行分析表征。结果表明,料液比不变时,最佳组合参数为:氢氧化钠浓度为5%,提取时间为4h,提取温度65℃,椰衣纤维表面半纤维素的产率最高,达14.33%。对所得的样品进行红外光谱分析,确认为椰衣半纤维素,采用GPC凝胶渗透色谱分析,数均分子量为49049,重均分子量为368354。所得的椰衣半纤维素,用稀硫酸水解后,再用高效液相色谱分析,其保留时间与标准木糖的保留时间高度吻合,且没有杂峰,可认为椰衣半纤维是由木糖组成的均多糖。采用稀盐酸水解法提取、去除椰衣纤维表面的半纤维素,最佳组合参数为:稀盐酸浓度1.7mol/L,提取时间2h,提取温度104℃,在此条件下,椰衣纤维表面半纤维素的最佳提取率为18.30%,木糖的标准回收率为88.5%～97.4%,重现性试验的相对平均标准偏差为±1.09%,该方法操作简单,重现性好,相对误差小,方便快捷。盐酸水解洗涤的椰衣纤维,采用高碘酸钠溶液氧化可制备醛基椰衣纤维,最佳组合参数为:高碘酸钠溶液浓度0.7mol/L,氧化时间3.5h,氧化温度45℃,高碘酸溶液的pH 2.3,以此工艺条件氧化,椰衣纤维表面醛基浓度为2.74mmol/g。所制备的醛基椰衣纤维,可与木聚糖酶通过Schiff反应,共价键合制备椰衣纤维固定化木聚糖酶。试验结果表明,最佳组合参数为:木聚糖酶酶液浓度为200U/mL,固定化时间为24h,固定化温度为39℃,缓冲液的pH为4.2,以此工艺条件制得的椰衣纤维固定化木聚糖酶,酶的活性为18.6 U。与游离酶相比,木聚糖酶被固定化后,酶最适反应温度提高了 5℃,最适pH向酸性方向前移了 0.6个单位,热稳定性与耐酸碱性均有明显提高,经反复循环使用7次,仍具有约80%的残余酶活,具有良好的重复使用性。利用椰衣纤维固定化木聚糖酶可催化水解椰壳木聚糖。试验结果表明,最佳组合参数为:水解时间为60min,加入固定化酶的量为0.1400g,椰壳木聚糖浓度40mg/mL,水解温度55℃,缓冲液的pH4.5,在此条件下,水解液中椰壳木聚糖的转化率(DE)达到 27.24%。动力学分析结果表明:木聚糖溶液的浓度与该固定化酶催化水解的反应速度满足米氏方程的“双曲线”特征,符合一级反应规律,利用公式推导可知,米氏常数Km=14.06mg/mL,Vm=0.1465mg/(mL.min),求出米氏方程为V = 0.1465S/S+14.06。