几丁糖在关节软骨缺损修复中的实验研究

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关节软骨缺损是骨科疾病中常见病理改变之一,至今尚无有效的治疗方法,成为急待解决的临床医学上的难题。实验目的:把几丁糖作为软骨细胞培养的支架,将几丁糖与软骨细胞一起进行体外培养,然后共同移植修复同种异体兔的膝关节软骨缺损,以探讨几丁糖在兔膝关节软骨缺损修复中的作用。实验方法:应用几丁糖无纺网作为细胞培养支架,使用前首先用10%多聚赖氨酸包埋以增加其对软骨细胞的吸附性,取幼兔关节软骨,通过机械分离及酶消化法获得软骨细胞悬液,然后把几丁糖支架与软骨细胞一起加入F12培养液内,置于37℃、5%CO2温箱内进行细胞培养,经过体外培养10天,软骨细胞数目增加约6倍,此时将载有软骨细胞的几丁糖支架植入同种异体兔的膝关节软骨缺损处,对侧膝关节作为对照,在对照侧膝关节Ⅰ:单纯植入几丁糖无纺网,对照侧膝关节Ⅱ:无任何植入物。实验结果:术后每隔2周处死2只家兔,对关节软骨的修复过程进行术后16周大体观察,组织学观察,电镜观察及修复组织厚度测定,结果显示几丁糖无纺网在术后2周开始降解吸收,术后10-12周完全降解吸收。术后第16周在实验侧关节组织学观察显示植入的软骨细胞生长分化良好,植入物周围未见免疫排斥反应,电镜下可见成熟的软骨组织,在实验侧关节软骨缺损得到完全修复,而对照侧(对照侧ⅠⅡ)为纤维组织修复。术后16周在实验侧与对照侧的修复组织厚度有显著性差异(P的.01人 实验结论:几丁糟无纺网经 10%多聚赖氨酸包埋后,对软骨细胞吸附性增强,软骨细胞在几丁糖 .’.支架上培养后可大量分裂、增殖,并且与几丁糖支架牢固结合不易丢失,有利于软骨细胞移植;几丁糖无纺网在软骨细胞移植术后2 周部分降解吸收,10叫 周完全降解吸收,此时移植的软骨细胞己生长分化为基本成熟的软骨组织,几丁糖的生物学特性符合组织工程中对细胞培养支架的要求;几丁糖负载软骨细胞移植修复同种异体兔膝关节软骨缺损,术后16 周可见关节软骨缺损区有新的、成熟的软骨组织形成,兔膝关节全层软骨缺损得到成功修复。
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