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目的:本实验通过建立糖尿病肾病(DN)的动物模型，应用泄浊解毒、活血通络中药对动物模型进行治疗，通过观察大鼠血糖、血脂、血清总蛋白、白蛋白、24小时尿蛋白定量、血肌酐、尿素氮等生化指标、肾脏病理学变化、免疫组化法检测肾组织中基质金属蛋白酶MMP-9，基质金属蛋白酶抑制剂TIMP-1的表达水平，研究泄浊解毒、活血通络中药治疗糖尿病肾病的作用机制，为在临床推广应用提供理论和实验依据。 糖尿病肾病的治疗研究虽然取得了长足的进展，但到目前为止没有有效的治疗方案和药物，导师檀金川教授根据传统中医理论并结合临床实践，以泄浊解毒、活血通络方为基本方，治疗糖尿病肾病临床疗效确切，本研究以MMP-9/TIMP-1在糖尿病肾病肾组织的表达情况证实本方治疗糖尿病肾病的疗效。 方法:选用85只雄性健康清洁级SD大鼠，体重160-180克，适应性喂养一周后，随机分15只为正常组，造模组70只，除正常组予普通饲料喂养外，造模组给予高糖高脂饲料喂养，并一次性予大鼠腹腔注射链脲佐菌素（streptozotocin，STZ）(35mg/kg)，72小时后尾静脉取血测血糖，血糖≥16.7mmol/L为DM造模成功。造模过程中死亡两只，另有一只血糖未达标，均予以剔除。造模组随机分为4组，中药组、西药组、中药+西药组、模型组。正常组、模型组给予相当剂量生理盐水灌胃，中药组予泄浊解毒、活血通络中药灌胃，西药组予厄贝沙坦灌胃，中药+西药组予中药联合厄贝沙坦灌胃每日一次，第16周末禁食不禁水，收集24 h尿液，检测各组大鼠24h尿蛋白定量，麻醉大鼠后在腹主动脉处取血，检测糖化血红蛋白、肌酐、尿素氮、血清蛋白、血脂;摘除肾脏，称量肾脏的重量，分离皮髓质，在光镜、电镜下观察各组大鼠肾脏的病理形态学改变，用免疫组化法检测各组大鼠MMP-9、TIMP-1在肾组织的表达情况。 结果: 1大鼠一般状态及存活率观察 结果显示:健康雄性SD大鼠85只，15只为正常组大鼠，正常组大鼠体重进行性增加，精神状态良好，无死亡情况。造模组注射STZ后，均出现明显的多饮、多食、多尿症状，逐渐出现毛发无光泽，饮食减少，精神萎靡，体型偏小等症状，治疗组在给药后饮食量逐渐增加，精神状态转好。 在实验过程中大鼠死亡情况，70只大鼠进行造模，注射STZ后72小时之内，造模过程中死亡2只，血糖未达标1只，原因可能与大鼠个体差异和操作有关，予以剔除。给药过程中中药组死亡1只、西药组死亡2只，模型组死亡4只。可能和灌胃方式不当或血糖过高有关。4只血糖恢复不符合条件被剔除。正常组15只，中药+西药组15只，中药组14只，西药组14只，模型组13只，共71只纳入实验结果分析。 2比较各组大鼠体重、肥大指数（肾重/体重） 与正常组相比，各组大鼠的体重明显减少(P＜0.05);模型组及各治疗组之间体重无差异(P＞0.05);右肾重各组之间无显著性差异(P＞0.05);模型、各治疗组肥大指数明显大于正常组(P＜0.05），模型与各治疗组无差异(P＞0.05）。 3比较各组大鼠24小时尿蛋白定量 于正常组相比，模型组及各治疗组24h尿蛋白定量明显增加(P＜0.05);与模型组相比，各治疗组明显下降(P＜0.05）;中药+西药组低于西药组、中药组(P＜0.05）;中药组、西药组无差别。(P＞0.05）。 4比较各组大鼠糖化血红蛋白 与正常组相比，模型组及各治疗组糖化血红蛋白(HbAc1)明显升高(P＜0.05);中药+西药组、中药组低于模型、西药组(P＜0.05）;中药+西药组与中药组无差别(P＞0.05）;模型组、西药组无差别(P＞0.05）。 5比较各组大鼠血脂 与正常组相比，模型组和各治疗组大鼠胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)水平明显增高(P＜0.05），与模型组相比，各治疗组胆固醇和甘油三酯水平显著下降(P＜0.05);各治疗组之间相比，中药+西药组胆固醇和甘油三酯水平均低于中药组和西药组(P＜0.05);西药组、中药组之间没有明显差异（P＞0.05）。 6比较各组大鼠肾功能 正常组、模型组、各治疗组肌酐、尿素氮变化无差别（P＞0.05）。 7比较各组大鼠血清蛋白 与正常组相比，模型组及各治疗组血清总蛋白（TP）、白蛋白(ALB)明显降低(P＜0.05）;与模型组相比，各治疗组明显升高(P＜0.05);各治疗组之间相比，中药+西药组高于西药组、中药组(P＜0.05）;中药组、西药组无差别(P＞0.05)。 8比较各组大鼠肾脏病理形态学变化 8.1光镜观察 光镜:正常组肾脏肾小球结构、大小正常，肾小球结构完整清晰，未见明显肥大，肾小球毛细血管基底膜正常无增厚，系膜及其基质无明显改变。模型组肾脏肾小球明显肥大，基底膜增厚，系膜细胞增生，系膜基质增多，系膜区显著增宽。各治疗组间比较，中药+西药组病理表现略轻于中药组和西药组，中药组和西药组之间无明显区别。 8.2电镜观察 电镜:正常组大鼠肾组织结构清晰正常，肾小球毛细血管基底膜结构均匀无增厚，足细胞足突排列整齐，未见融合及缺失;模型组大鼠可见肾小球基底膜显著增厚，厚薄不均匀，外突呈丘状，足突广泛融合，血管内皮细胞高度增生。各治疗组均有不同程度的病理改变。 9 TIMP-1、MMP-9免疫组化观察结果 正常组可见MMP-9阳性染色的明显表达;与正常组相比，模型组和治疗组大鼠肾小球中MMP-9表达量明显减弱(P＜0.05);与模型组相比，各治疗组MMP-9的表达量明显增强(P＜0.05);治疗各组间比较，中药+西药组MMP-9的表达量多于中药组和西药组(P＜0.05)，中药组和西药组无显著差异(P＞0.05）。 正常组未见TIMP-1阳性染色的明显表达，或者少量表达;与正常组相比，模型组和治疗组大鼠肾小球中TIMP-1表达量明显增加(P＜0.05);与模型组相比，各治疗组TIMP-1的表达量明显减弱(P＜0.05);各治疗组间比较，中药+西药组TIMP-1的表达量少于中药组和西药组(P＜0.05)，中药组和西药组无显著差异(P＞0.05)。 结论: 1泄浊解毒、活血通络中药能改善DN大鼠一般状况，降低DN尿蛋白的排泄、降低糖化血红蛋白、降低血脂，提高血浆蛋白，保护肾功能，可减轻肾组织病理损害，从而延缓DN的进展。 2可抑制糖尿病肾病大鼠肾组织TIMP-1的表达、上调肾组织MMP-9的表达，阻止肾小球硬化，减轻肾脏慢性损伤，延缓DN进一步发展。 3泄浊解毒、活血通络中药与厄贝沙坦联合用药，其作用比单一用药更强，体现了中西医结合的优势。