灯盏细辛注射液是由灯盏细辛提取制成的灭菌水溶液,具有活血祛瘀,通络止痛的功效。其适用于心脑血管及其它缺血性和伴有微循环障碍的疾病,临床上用于缺血性中风、冠心病心绞痛等的治疗。根据现有文献报道,咖啡酰奎宁酸类及黄酮类化合物为灯盏细辛药材的主要成分。但是,灯盏细辛注射液的化学成分尚不够清晰,而且其质量控制存在欠缺。另外,灯盏细辛注射液的体内药效物质基础及动态变化规律尚未完全阐明。因此,运用现代化的技术和方法对灯盏细辛注射液的药效物质基础进行全面的解析对于其作用机制和临床疗效的科学阐释具有非常重要的研究意义。本研究以灯盏细辛注射液为研究对象,从灯盏细辛注射液的主要化学成分、体内原型及代谢产物等方面阐明其化学物质基础;通过建立指纹图谱为灯盏细辛注射液的质量控制提供参考;研究多成分的体内动态变化规律为临床合理用药提供科学依据。研究内容如下:采用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF-MS^E）技术结合UNIFI^TM软件的多数据处理方法对灯盏细辛注射液的主要化学成分进行全面表征。通过查阅相关文献及检索数据库,共建立灯盏细辛药材及其制剂的化学成分数据库252个,然后将此数据库导入到UNIFI^TM平台与采集的灯盏细辛注射液的质谱数据进行匹配。基于保留时间、不同结构类型化合物的质谱裂解规律、对照品比对及参考相关文献,在负离子模式下对灯盏细辛注射液的化学成分进行鉴定。最终共鉴定出灯盏细辛注射液中包括黄酮类和酚酸类在内的40个化学成分。采用高效液相色谱串联二极管阵列检测器（HPLC-DAD）技术建立了20批灯盏细辛注射液的指纹图谱,并使用《中药指纹图谱相似度评价软件》计算其相似度大于0.98。其中,以野黄芩苷为参照物峰,共建立了28个共有色谱峰,并通过对照品对其中的13个共有色谱峰进行了指认。HPLC指纹图谱的建立为灯盏细辛注射液的质量控制提供参考。在灯盏细辛注射液化学成分和质量控制的基础上,本研究采用UPLC-Q-TOF-MS^E结合Metasense^TM预测系统及UNIFI^TM数据处理平台,对灯盏细辛注射液进入大鼠体内的原型成分及代谢产物进行了定性分析。在大鼠血浆、尿液和粪便中共检测到灯盏细辛注射液原型成分25个。此外,首次对灯盏细辛注射液的代谢产物进行鉴定,共鉴定出45个代谢产物,其中包括18个黄酮类和27个酚酸类化合物。其代谢反应类型主要包括甲基化反应、葡萄糖醛酸化反应、加氢反应、乙酰化反应、水解反应和磺酸化反应等。在以上研究的基础上,本研究对灯盏细辛注射液多成分的药代动力学行为进行了比较研究。假手术组大鼠和大脑中动脉栓塞模型组大鼠分别经过尾静脉注射8.4m L/kg（大鼠体重）灯盏细辛注射液,于6 h内采集不同时间点大鼠血浆样品。分别定量血浆中黄酮类（野黄芩苷、芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷）及酚酸类（3-O-咖啡酰奎宁酸、5-O-咖啡酰奎宁酸、4-O-咖啡酰奎宁酸、1,3-O-二咖啡酰奎宁酸、3,4-O-二咖啡酰奎宁酸、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸、灯盏花苷I）化合物。在负离子模式下,采用多反应离子监测方式测定10个化学成分的血药浓度,比较药动学参数的差异。通过对液相条件及质谱条件的优化,最终实现在15 min内对血浆中的10个化学成分进行同时监测。野黄芩苷、芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷、3-O-咖啡酰奎宁酸、5-O-咖啡酰奎宁酸、4-O-咖啡酰奎宁酸、1,3-O-二咖啡酰奎宁酸、3,4-O-二咖啡酰奎宁酸、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸、灯盏花苷I的最低定量限分别为0.25 ng/m L、0.25 ng/m L、0.25 ng/m L、0.20 ng/m L、0.25ng/m L、0.17 ng/m L、0.25 ng/m L、0.50 ng/m L、0.25 ng/m L和0.50 ng/m L。目标分析物的回收率范围为78.56%～94.87%,日内精密度和日间精密度范围为2.56%～13.17%。与假手术组相比,模型组大鼠血浆中咖啡酰奎宁酸类化学成分的药时曲线下面积显著增加,4-O-咖啡酰奎宁酸、1,3-O-二咖啡酰奎宁酸、3,4-O-二咖啡酰奎宁酸和4,5-O-二咖啡酰奎宁酸的平均滞留时间显著增加。