鸡包涵体肝炎(chicken inclusion body hepatitis,IBH)是由禽腺病毒引起的一种急性传染病,已知有12种血清型的禽腺病毒与本病有关。病鸡死亡突然增多,严重贫血、黄疸、肝脏肿大出血和坏死灶,可见肝细胞核内有包涵体。该病又称贫血综合征。禽腺病毒主要侵害肝脏组织,并在感染细胞内产生核内包涵体。据报道我国山东地区以及内蒙地区鸡包涵体肝炎流行的致病毒株血清型主要为血清八型。因其可导致肉鸡蛋鸡的生产性能的下降,以及导致免疫抑,造成免疫失败或易发继发感染,因而得到越来越多的关注。然而生产实践中尚未有一种简洁、快速、经济的检测方法,斑点杂交技术凭借简单的操作和较好的成本控制成为了比较理想的选择。参考相关文献设计一对引物,同时根据NCBI GenBank数据库中禽腺病毒各种血清型Hexon六邻体蛋白基因的保守序列设计一对引物用以相互辅证,通过PCR扩增疑似病例的肝脏病料,得到相应大小的目的产物,目的条带经过切胶回收、纯化后,进行克隆转化,获得重组菌,挑取十二个克隆进行测序,序列比对后有十株重组菌序列与禽腺病毒血清八型序列同源性在百分之九十八以上,最高达百分之九十八点八。提取重组菌质粒酶切后,用地高辛标记即为包涵体肝炎病毒核酸探针,探针进行灵敏度检测表明该探针的最小检出量为1pg,特异性检测表明探针与其他病毒核酸无交叉反应。通过条件优化后建立斑点杂交检测方法,并检测山东部分地区采集的病料。处理疑似病料接种鸡胚肾细胞,经过传代回收细胞DNA,并用探针检测,两代后可检测到鸡包涵体肝炎病毒核酸的存在,细胞实验用禽腺病毒血清八型标准毒株作为阳性对照。通过实验,表明了鸡包涵体肝炎在养殖业中的广泛存在,山东地区的主要血清型属于禽腺病毒八型,与以往的流行病学调查结果一致。建立的斑点杂交诊断方法有良好的特异性和较高的灵敏度,可以用于生产中实验室诊断和检测。