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知母(Rhizoma Anemarrhenae)为百合科植物知母(Anemarrhena asphodeloides Bge.)的根茎,是中国药典一部收载的临床常用重要中药,具有清热泻火、滋阴润燥的功效。目前知母药材的质量评价方法相对简单,不能全面反映知母药材的质量,而且市场上流通的药材存在产地和批号紊乱等问题。此外,对于知母原药材资源的利用尚不充分,一般来说,都是弃叶子和须根,仅选用主根入药。中药指纹图谱技术是一种新的中药质量控制模式,能比较全面的反映药材的内在质量,具有整体性和特征性和稳定性等特点,已成为国际认可的控制中药或天然药物质量的最有效的手段。针对这种情况,本文采用调查收集、实验室分析和统计学方法进行了相关研究。 1.制备菝葜皂苷元和芒果苷对照品;通过大孔吸附树脂联用聚酰胺树脂分离得到一化学成分,具体结构尚未确定。 2.通过对知母各种有效成分分析方法的研究,建立起知母质量的综合评价体系。包括多项有效成分含量评价和高效液相指纹图谱分析两部分。前者所选定的指标为菝葜皂苷元、和芒果苷,分属皂苷、黄酮两大类。具体的工作包括:皂苷和黄酮对照品的制备;建立了各种有效成分的含量测定方法;建立了知母药材的高效液相指纹图谱分析方法,得到知母药材的标准图谱。 3.通过建立知母原药材、总黄酮、总皂苷的相关标准图谱;选择相同的25批样品,利用spss13.0统计软件进行聚类分析,从中探讨其内在的联系。 4.利用高效液相图谱进行叶子、须根和主根的化学成分的比较,探讨其相关性,为知母药材资源的进一步利用提供可行性依据。 5.对所收集到的9批不同采收季节、采收地点的知母药材中的芒果苷以及菝葜皂苷元含量进行测定,发掘其中存在的成分含量季节变化规律。以确定知母采收的最佳时季。本实验结果表明,4月份采收的知母药材中的总皂苷和总黄酮含量均为最高,为采收知母药材的最佳时季。 本论文创新性的工作有以下方面: 1.知母有效成分分析方法有一定创新。改进了菝葜皂苷元薄层鉴别的方法;新增了甾体化合物的薄层检查项。 2.提出了知母质量综合评价体系。建立菝葜皂苷元和芒果苷含量测定结合药材标准图谱的质量综合评价体系。 3.通过运用聚类分析统计方法对市面上的药材进行归类,探讨成分含量与采收季节间的关系。 4.进行知母原药材各部位间的化学成分比较,研究其共性,为知母资源的进一步开发提供可行性依据。 5.通过对采收样本中的芒果苷和菝葜皂苷元含量进行测定,确定采收知母药材的最佳时季。