目的 研究自身生长因子PRP对牙周膜成纤维细胞（PDLFs）增殖的影响，并和自体PDLFs移植修复犬慢性牙周组织缺损。方法 1．采用改良组织块法，全麻下拔狗上颌第3切牙，刮取牙周膜，以玻璃片覆盖组织块贴壁替代传统的干燥贴壁法。细胞培养成功后传代，用四甲基偶氮唑蓝比色、免疫组化染色、Von Kossa染色等方法测定其生物学活性。2．利用二次离心（1000转／分钟，15分钟；3000转／分钟，8分钟）分离全血，获得PRP。将PRP设5个浓度组（5％，10％，20％，30％，50％），与对照组（不含PRP）比较，观察它们对PDLFs增殖的影响。3．将5只成年杂种狗形成慢性Ⅱ度根分叉病变模型，分别随机采用GTR+PRP+Bio-Oss、GTR+PRP+Bio-Oss+cells、GTR+cells和GTR治疗，其中GTR组6颗牙，其余3组各为8颗牙。12周后作病理切片，HE染色观察牙周组织再生情况。结果 1．PDLFs原代培养成功率达到89％，免疫组化检测结果为波形丝蛋白阳性，角蛋白阴性，体外培养PDLFs可自然形成矿化结节。2．所获得的血小板浓度均超过全血的4倍，实验组各浓度的PRP均可促进PDLFs增殖，实验组间以及实验组与对照组相比差异均具有显著性（p＜0.01）。当PRP浓度在5％～30％时这种促增殖作用呈剂量依赖性。3．动物实验中发现GTR组的新生牙槽骨、牙骨质和牙周组织高度分别为0.52+／₀.21 mm、0.8+／₀.13 mm、1.9／₀.10mm。而另外三组的新生牙槽骨、牙骨质和牙周组织高度分别为GTR+PRP+Bio-Oss组：1.36+／₀.17 mm、1.92+／₀.18 mm、2.62+／₀.16mm；GTR+PRP+Bio-Oss+cells组：1.42+／₀.22mm、2.07+／₀.19mm、2.68+／₀.20mm；GTR+cells组：1.39+／₀.19mm、1.82+／₀.16mm、2.55+／₀.12mm，这三组牙槽骨、牙骨质和牙周组织的修复再生效果均明显优于GTR组（P＜0.05），而它们之间差别无显著性。结论 1．采用改良组织块法可以简便、稳定获取原代PDLFs。体外培养PDLFs具有部分成骨样细胞表型特征，可作为牙周组织工程种子细胞来源。2．二次离心法是一种简单易行的提取PRP的方法。PRP可促进PDLFs的增殖。3．应用GTR技术结合自身PRP-Bio-Oss和＼或自体牙周膜细胞移植可显著促进狗牙周组织缺损的再生。