论文部分内容阅读
目的:通过利用两种不同实验性大鼠心肌缺血动物模型,以辛伐他汀为阳性对照药,研究复方新塔花(由芳香新塔花、神香草、牛至三种中草药组成传统方药)对急性心肌缺血和慢性心肌缺血大鼠的保护作用并初步研究其机制。方法:①采用高脂乳剂联合注射维生素D3导致血管内皮损伤,诱导慢性心肌缺血模型,按照随机分组原则,将74只SD大鼠分为六组:正常组、模型组、辛伐他汀组、新塔花高中低三个剂量组。各试验组每日上午给予高脂乳剂灌胃(8mL/kg/d),高脂灌胃1周后腹腔注射维生素D3注射液70U/kg,第3周开始给予复方新塔花低剂量组(6.25g/kg)、中剂量组(12.5g/kg)和高剂量组(25g/kg)、阳性药为辛伐他汀(0.45mg/kg)连续给药14周后,采血测定胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)等四项血脂水平,检测细胞因子(L-1β、TNF-α、IL-6、IL-10)水平,血浆血栓素PGE2和TXB2水平。HE染色观察心脏和冠状动脉组织形态。②建立垂体后叶素(Pit)诱导急性心肌缺血大鼠模型,SD大鼠分为6组:正常组、模型组、辛伐他丁阳性药组(0.45mg/kg)、复方新塔花低剂量组(6.25g/kg)、复方新塔花中量组(12.5g/kg)、复方新塔花高剂组(25g/kg),观察心电图ST段变化,检测血清肌酸激酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDHA)和肌钙蛋白(cTn1)含量,并观察心脏组织病理。结果:慢性心肌缺血实验结果:①B超结果显示模型组大鼠冠状动脉内壁有明显的粗糙,可见斑块及血管狭窄,说明慢性心肌缺血模型的建立是成功的。与模型组相比,辛伐他汀组大鼠动脉内壁局部增粗减少,未见明显的斑块。与模型组相比,复方新塔花各剂量组颈动脉B超声结果均有改善,高剂量组大鼠动脉壁未见明显的斑块,但是可见不规则血管增粗,中剂量组大鼠动脉内壁可见少量斑块,血管管壁内膜有增厚,复方新塔花低剂量组大鼠动脉内壁有斑点状粥样结构。②血脂检测结果显示模型组大鼠血清中胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白的水平均升高,高密度脂蛋白含量降低,具有统计学意义。与模型组比较,复方新塔花三个剂量组及辛伐他汀组血清中TC、TG及LDL含量明显降低,HDL含量升高,具有统计学意义。③各组大鼠血浆TXB2及PGE2水平的变化结果显示,模型组血浆中TXB2及PGE2水平显著升高,具有统计学差异。复方新塔花高、中剂量组及阳性药组血浆中TXB2及PGE2含量明显降低,具有统计学差异。④各给药组大鼠血清中细胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α水平降低,而IL-10明显升高,具有统计学意义。⑤HE染色结果显示:正常组血管内膜光滑平整,未见病理性变化。模型组内膜增厚,内膜下脂质沉积有斑块形成,可见血管狭窄,并可见炎性细胞浸润。与模型组相比,辛伐他汀组内膜的脂纹形成,可见少许条状增粗,炎性细胞数量明显减少。与模型组相比,复方新塔花三个剂量组内膜增厚有不同程度的改善,可见少量粥样斑块灶,可见炎性细胞浸润现象,但是较模型组有减少。高剂量组血管增粗和脂纹改善更明显,提示复方新塔花可能具有减少血管粥样斑块形成的作用。急性心肌缺血实验结果:①各组大鼠心电图变化结果显示正常心电图有P、Q、RST等波形;模型组大鼠快速注射垂体后叶素30~90s后心电图出现了ST段抬高>0.1mv或ST段下移>0.1mv等变化,显示急性心肌缺血大鼠模型成功建立,尤其在30s时最明显。与模型组相比复方新塔花低、中、高剂量给药组均可改善ST段变化,心电图ST段变化<0.1mv,具有统计学意义。②各组大鼠心率变化结果显示:模型组注射Pit30~90s后大鼠出现心率加快,模型组各时间点心率与正常组相比较差异均有统计学意义(P<0.01);给药组心率变慢,与模型组相比,阳性药物组及各给药组心率差异具有统计学意义(P<0.05)。③各组大鼠血清CK-MB,LDHA及cTn1水平的变化结果显示:模型组血清中CK-MB,LDHA的水平及含量明显升高(P<0.01),cTn1水平及含量降低(P<0.01),与模型组比较,复方新塔花低、中、高剂量组及辛伐他汀组血清中CK-MB,LDH活力及含量明显降低(P<0.05),cTn1水平及含量降低(P<0.05)。④急性心肌缺血大鼠心肌组织病理形态学变化结果显示HE染色结果显示:正常对照组心肌纤维排列成束,细胞核为椭圆形位于细胞中央被染为蓝色,心肌细胞整齐,胞质染色均匀,组织结构清晰。模型组大量心肌纤维排列紊乱,大量炎性细胞浸润,部分心肌细胞溶解消失。与模型组相比,阳性对照组心肌纤维排列紊乱明显改善,炎性细胞浸润明显减少。与模型组相比,复方新塔花低、中、高剂量给药组大部分心肌纤维结构正常,炎性细胞浸润明显减少,其中高剂量组心肌组织学改变相对轻微,改善更明显,提示复方新塔花可能具有减轻心肌损伤的作用。结论:复方新塔花三个剂量组均可调节血脂,降低炎症细胞因子水平,降低血栓素的含量,改善B超和HE染色显示的内膜增厚,炎性细胞浸润,斑块形成等病理变化,减轻心肌损伤程度。复方新塔花三个剂量组可对抗垂体后叶素引起的急性心肌缺血ST段偏移,降低血清CK-MB,LDHA水平及cTn1含量;改善心肌缺血引起的心肌纤维排列紊乱,炎性细胞浸润等变化。本研究结果显示复方新塔花对急慢性心肌缺血具有显著的保护作用,说明复方新塔花减轻心肌损伤、保护心肌细胞的作用可能与其抗炎抗氧化作用有关。