康肾Ⅰ号对老年维持性血透病人IL-1、IL-2、IL-6mRNA水平影响的研究

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研究目的: 本研究为广东省中医药管理局课题“老年血透病人的免疫功能与健脾补肾法的免疫调节作用”的一部份。本文主要观察健脾补肾中药康肾Ⅰ号对老年维持性血液透析患者免疫功能紊乱的调节作用,采用RT-PCR法检测其外周血单个核细胞(PBMC)的IL-1β、IL-2、IL-6mRNA水平,根据服药三个月前后的变化情况,试图为辨证治疗老年维持性血液透析患者免疫功能紊乱提供免疫学依据,特别是从细胞和分子水平探讨其治疗机理,以期阐明老年血液透析患者免疫功能紊乱的病因和辨证规律,进一步提高临床疗效。 实验方法: 选择已进行三个月或以上规律血液透析的原发性肾疾患,老年维持性血液透析患者20名,按3:1比例随机分为康肾Ⅰ号治疗组与空白对照组。以单盲法给药处理,观察其服药前及服药后第三月末透析前外周血单个核细胞IL-1β、IL-2、IL-6mRNA水平的变化,以了解健脾补肾中药康肾Ⅰ号对老年维持性血液透析患者免疫功能紊乱的调节作用。 采取敏感性及特异性相对较高的RT-PCR法,检测老年维持性血液透析患者外周血单个核细胞IL-1β、IL-2、IL-6mRNA水平。经反复摸索,确立反应条件为:逆转录42℃,30min;99℃,5min灭活逆转录酶;PCR扩增:变性94℃,30秒;退火58℃,30秒:延伸72℃,1.5分钟30循环。 实验结果: 1.20名患者中,治疗前有IL-1β、IL-2、IL-6mRNA表达的有9名,占总数的45%。其表达情况不一,或有一项、或有两项、或有三项有表达。这9名患者在治疗组和对照组中各有6名和3名。 2.服药前与治疗三个月后,将治疗组6名表达患者的同一项表达水平进行自身前后对照,发现IL-2mRNA水平升高,IL-1β、IL-6mRNA水平降低。 3.服药前,对照组有3名患者有表达。三个月后,仅有一名患者有表达,其IL-6mRNA水平降低。由于样本较少,未进行对照组与治疗组间的相互对比。 结论: 1.20名患者中只是部分N5%)有白介素表达,这个现象考虑为个体差异所致。 2.康肾1号是根据老年维持性血液透析患者病机症候特点及临床用药经验,辨证论治提出经验方。通过观察老年维持性血液透析患者服药三个月前后,PBMC的几l、IL上、IL6m删A表达水平的变化,提示康肾1号从提高L毛 InRNA水平和降低几刁、IL6 m狮水平两方面增强了IL毛活性,从而提高T淋巴细胞免疫力,从分子水平论证了康肾1号具有调节老年维持性血液透析患者免疫功能紊乱的作用。
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