心血管疾病感染因子蛋白芯片诊断系统的研制

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以动脉粥样硬化(AtherosclerosisAS)为基础心血管疾病是目前发病率和死亡率最高的疾病。过去几十年的研究揭示了许多与该病相关的独立危险因子如高胆固醇血症、吸烟、高血压、糖尿病、遗传、性别等,但尚不能完善地解释某些流行病学特征。近年来,“感染学说”受到了大家的关注,认为AS是一种特殊的慢性炎症,其发生发展与体内某些微生物反复持续感染有关,这些微生物包括肺炎支原体、病毒、幽门螺杆菌等。WHO已将感染因子的防治列为心血管疾病的一项常规性治疗措施。 生物芯片(biologicalchip)技术是利用生物大分子间具有特异相互识别的特点而发展起来的,可在一次反应中进行多种信息的平行分析。随着生物芯片检测程度的不断提高,使得芯片实验室(lab-on-a-chip)的出现成为可能,它是包括芯片处理、信号扫描和数据分析在内的一种高技术集成系统。蛋白质芯片是由固定于支持介质上的蛋白质或多肽构成的微阵列,所使用的固相支持物有玻片、PVDF(polyvinylidenedifluoride)膜、ELISA板等,可进行高通量的定性和定量分析。近年来高密度蛋白点阵在中有了不少应用。采用的标记技术大多是在生物分子上偶联荧光物质,这样自动化仪器就可获得芯片片基上反应后的光学信号。 在本实验室以往工作基础上和软件信息小组一起完成了心血管疾病感染因子免疫信息化平台的系统方案。首先在斑点金免疫渗滤试验(DIGFA)基础上联合以往工程技术获得的心血管疾病感染因子抗原原料建立芯片实验室操作流程,制备出免疫芯片样品,阳性及阴性对照检测性能良好。采用硝酸纤维素(NC)膜和胶体金标记技术使芯片实验操作快速、简便、稳定。研究开发了芯片阅读仪,用CCD结合视频采集技术将芯片反应信号转化为计算机可以识别的数字信号。构建数据库及分布体系还有相应网络系统以实现结果分析、存储、交换和信息共享。从而最终建立了心血管疾病感染因子检测的综台化信息平台。
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