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肝细胞癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,新型治疗方法逐步增多,但根治性手术和肝移植仍是主要治疗手段,其高复发率和高死亡率仍然为得到明显改善。卷曲蛋白2(frizzled2,FZD2)是一种新近发现的肿瘤相关分子,它高表达于多种恶性肿瘤,参与调节肿瘤的生物学行为,影响肿瘤患者的预后,有望成为肝细胞癌的治疗靶点。本文旨在探究FZD2与上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)、拟态血管形成(vasculogenic mimicry,VM)以及肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)特性三方面的关系,将有助于阐明肝细胞癌的转移复发机制,为患者的早期诊断、靶向治疗以及预后改善研究提供理论基础。1、FZD2在肝细胞癌组织中的表达及其临床意义我们采用荧光定量PCR和免疫组化染色分别从基因转录水平和蛋白水平检测100例肝细胞癌患者癌组织和癌旁组织FZD2的表达水平,发现其在癌组织的表达量显著高于癌旁组织(P<0.05);统计学分析表明,FZD2表达量与肿瘤大小、病理分化程度、微癌栓、TNM分期、BCLC分期、转移以及早期复发等多种病理参数有关(P<0.05);生存分析显示,FZD2高表达的患者术后无瘤生存时间和总生存时间明显缩短(P<0.05),提示FZD2可能是肝细胞癌潜在的预后指标。2、FZD2调控肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力为了探究FZD2在肝细胞癌中的促癌作用,我们分别构建siRNA瞬转FZD2低表达肝癌细胞模型和慢病毒稳转FZD2过表达细胞模型,采用CCK-8法、平板克隆形成法、流式细胞仪、Transwell法以及Westernblot检测发现,敲低FZD2表达抑制肝癌细胞增殖、迁移侵袭能力以及EMT进程,诱导肝癌细胞凋亡,而过表达FZD2则促进细胞增殖、迁移侵袭以及EMT特性;采用FZD2低表达稳转细胞株构建裸鼠皮下移植瘤模型证实,FZD2也可以调控肝癌细胞体内增殖能力和EMT进程。3、FZD2调控肝细胞癌的VM形成能力VM是肝细胞癌转移复发的危险因素,其与FZD2的关系尚未明确。我们采用CD34/PAS双染法观察肝细胞癌和裸鼠移植瘤组织VM的表达情况,发现FZD2与VM表达呈正相关(P<0.05);细胞三维培养条件下,敲低FZD2抑制肝癌细胞的成管能力,而过表达FZD2则增强这种能力,提示FZD2介导肝细胞癌VM形成。4、FZD2调控肝癌细胞的CSCs特性除VM外,CSCs特性也与肝细胞癌转移复发密切相关。流式细胞仪检测到,敲低FZD2表达后肝癌细胞干细胞亚群CD44(+)细胞减少(P<0.05),Westernblot和免疫组化染色进一步证明,肝癌细胞和移植瘤组织中CSCs转录因子Nanog和SOX2表达下调,而过表达FZD2上调肝癌细胞上述干细胞表型。因此,FZD2参与调节肝癌细胞CSCs特性。结论:FZD2可能通过调控EMT、VM以及CSCs特性促进肝细胞癌的转移复发,有望成为肝细胞癌新的预测指标和治疗靶点。