酸浆宿萼总皂苷对人肝癌细胞抑制机理

来源 :山西农业大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:cool_king_wq
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[目的]研究酸浆宿萼总皂苷(TSP)对人的SMMC-7721肝癌细胞增殖的抑制作用,并从分子水平和蛋白水平探讨TSP抗肿瘤的作用机理。[方法与结果]1.分别用终浓度为25μg/ml、50μg/ml. 100μg/ml和200μg/ml的TSP孵育SMMC-7721肝癌细胞24h、48h和72h,用MTT法检测细胞活力。结果表明,TSP对SMMC-7721肝癌细胞的抑制程度与TSP的浓度和上药时间具有线性关系。与空白组相比,TSP50μg/ml作用24h时,TSP对SMMC-7721肝癌细胞的抑制程度达到了12%(p<0.05):当TSP浓度为200μg/ml,作用72h,抑制率则为97.7%(P<0.01)。2.采用凯基细胞凋亡试剂盒测定TSP对人的SMMC-7721肝癌细胞凋亡的促进程度。结果表明:当TSP作用于SMMC-7721肝癌细胞48h,对SMMC-7721肝癌细胞的凋亡有很好的促进作用。3.利用qRT-PCR法检验抑癌相关基因caspase-3、apaf-1、caspase-9、细胞色素C、p53 和 Bax mRNA的表达。结果表明:与空白组相比,TSP终浓度为25μg/ml、50μg/ml、 100μg/ml、200μg/ml时能显著或极显著的抑制SMMC-7721肝癌细胞增殖,提高相关基因caspase-3、细胞色素C的表达量,且具有时间和浓度线性关系。当TSP作用72 h时,TSP能显著的抑制SMMC-7721肝癌细胞增殖,降低相关基因apaf-1、p53的表达;表达量分别降低了54.1%、56.25%,且差异显著。当TSP作用于细胞72 h,终浓度为200μg/ml时,才能显著的增加基因Bax的表达,表达量增加43.9%。TSP对相关基因caspase-9的表达量没有提高。4.运用Western blot法检测线粒体通路上促进SMMC-7721肝癌细胞凋亡相关蛋白caspase-3、细胞色素C活性。结果表明:与空白组相比,终浓度为100μg/ml的TSP(在TSP作用48 h后)能显著或者极显著的增加相关蛋白caspase-3、细胞色素C的表达;表达量分别增加68.18%、75.47%。与TSP作用时间和浓度呈正相关。[结论]酸浆宿萼总皂苷(TSP浓度为25μg/ml、50μg/ml和200μg/ml)能增加抑癌相关基因caspase-3、细胞色素C、Bax的表达,明显的促进人的SMMC-7721肝癌细胞的凋亡(p<0.05);降低抑癌相关基因apaf-1、p53的表达;增加抑癌相关蛋白caspase-3、细胞色素C的表达。与TSP作用时间和浓度呈正相关。综上可知,酸浆宿萼总皂苷具有一定的体外抑制肿瘤的功效。
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