食用胶原蛋白肽是近年来发展较快的一种食用性保健蛋白。它主要从海洋动物或者海洋动物的加工废料(鱼皮,鱼鳞)中提取,经过分离纯化以及干燥加工后制得成品即可食用。其中,胶原蛋白分离纯化的重要方法为离子交换层析法。但是由于用于分离纯化蛋白的离子交换介质具有宏观性强、构象复杂以及蛋白分子尺寸较小、荷电数不均一等特点,很难从微观层面研究纯化过程中离子交换介质与胶原蛋白肽之间的相互作用。本论文制备了二乙氨乙基(DEAE)琼脂糖,利用LB膜技术将其制备成单分子膜,作为离子交换层析介质的模拟界面,采用垂直提拉法转移到石英晶体微天平(QCM)芯片上,研究胶原蛋白肽在离子交换层析界面上的吸附作用。(1)基于LB膜技术,研究了具DEAE琼脂糖结构的LB膜制备方法。DEAE琼脂糖是一般胶原蛋白肽纯化过程中所使用的离子层析交换介质。利用LB膜技术制备了DEAE琼脂糖单分子层,分析其表面压(π)-面积(A)曲线,崩溃压较高,成膜过程明显。研究浓度对DEAE琼脂糖成膜情况的影响,确定最佳成膜浓度为0.5 mg/mL。考察配基密度与表面电势的关系,其表面电势随着配基密度的增加而增大。采用原子力显微镜(AFM)和布鲁斯特角显微镜(BAM)对制备的LB膜进行了表征,得出表面膜的表面平整、紧密,厚度约为7.9 nm,表面粗糙度为2 nm。由此说明,DEAE琼脂糖可被制备成LB膜并成功转移到硅片上。将其用于模拟DEAE琼脂糖离子交换层析界面,研究微观层面上胶原蛋白肽或者其他蛋白质与离子层析交换介质的相互作用,具有一定的理论价值以及实际意义。(2)利用DEAE琼脂糖LB膜模拟离子层析交换界面,采用石英晶体微天平分析胶原蛋白肽在模拟界面上的吸附量。研究内容分胶原蛋白肽分子量和DEAE琼脂糖层析介质配基密度两个方面。在同一离子层析交换介质配基密度情况下,选取500 Da、1000Da、3000 Da、5000 Da四种分子量的胶原蛋白肽。结果表明,胶原蛋白肽的吸附量随分子量的增加而增加。在同一分子量情况下,配基密度选取6 mmol/L、16 mmol/L、23 mmol/L三种情况。结果表明随着配基密度的增加,胶原蛋白肽的吸附量增加。以上结果得出,在胶原蛋白肽的实际分离纯化过程中,可以通过选取分子量较大的肽进行分离纯化以及提高离子交换介质的配基密度来提高纯化效率,减少胶原蛋白肽的浪费率,提高其纯度,增加经济效益。