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目的:通过体内外实验探讨清解扶正颗粒（Qingjie Fuzheng Granule,QFG）联合5氟尿嘧啶（5-fluorouracil,5-FU）治疗大肠癌协同作用及对PI3K/AKT通路的影响,阐明其药物联合的作用机制,并为其临床应用提供新的实验依据。方法:体外实验:1.Chou-Talalay计算大肠癌细胞株HCT-8、HCT-116不同时间段QFG与5-FU联合指数。2采用CCK8检测QFG联合5-FU不同时间段细胞活力影响;运用倒置显微镜观察细胞形态;集落形成检测QFG联合5-FU对细胞增殖影响;Western Blot检测细胞p53、p21、CDK4、Cyclin D1蛋白表达水平。3.Annexin V/PI、DAPI染色观察细胞凋亡;Western Blot检测细胞Bax、Bcl-2、cleaved-caspase-3等凋亡相关蛋白表达水平。4.迁移、侵袭实验检测细胞转移能力;Western Blot检测细胞E-cadherin、N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平。5.Western Blot检测细胞DPD、TS蛋白表达水平,评价药物对5-FU代谢影响。6.Western Blot检测细胞PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达水平,10%FBS激活PI3K/AKT通路,进行显微镜观察、集落实验、DAPI染色实验、迁移、侵袭实验,观察QFG联合5-FU对细胞影响。体内实验:皮下移植瘤模型:采用HCT-8细胞构建裸鼠皮下移植瘤模型,根据瘤体体积将裸鼠随机分成Control组、QFG组、5-FU组以及QFG+5-FU组。QFG组按1 g/kg/天进行灌胃,5-FU组25 mg/kg/天进行注射,QFG+5-FU组按QFG 1 g/kg/天灌服,同时25 mg/kg/天进行注射5-FU,Control组按照等体积的生理盐水灌胃,隔天测量瘤体体积和体重,连续给药3周后处死裸鼠,剥离瘤体组织称重。免疫组化（IHC）检测瘤体组织Ki67的表达;TUNEL染色检测瘤体组织的细胞凋亡;Western Blot检测瘤体组织p53、p21、CDK4、Cyclin D1、Bax、Bcl-2、cleaved-caspase-3、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、DPD、TS、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT等蛋白表达情况。结果:体外实验:1.不同时间段QFG联合5-FU对HCT-8、HCT-116细胞协同指数CI＜1;2.QFG联合5-FU对HCT-8细胞,不同时间段,细胞活力相较于单药组有显著差异（P＜0.05）;集落形成实验提示QFG联合5-FU相对于单药,更具有抑制细胞增殖作用（P＜0.05）。同时QFG联合5-FU相对于单药,可抑制CDK4、Cyclin D1表达,增强p53、p21蛋白表达（P＜0.05）。3.Annexin V/PI、DAPI染色实验提示QFG联合5-FU相对于单药,更具有促进细胞凋亡作用（P＜0.05）。同时QFG联合5-FU相对于单药,可抑制Bcl-2表达,增强Bax、cleaved-caspase-3蛋白表达（P＜0.05）。4.迁移、侵袭实验提示QFG联合5-FU相对于单药,更具有抑制细胞转移作用（P＜0.05）。同时QFG联合5-FU相对于单药,可抑制N-cadherin、Vimentin蛋白表达,增强E-cadherin蛋白表达（P＜0.05）。5.QFG联合5-FU相对于单药可抑制DPD、TS蛋白表达（P＜0.05）。6.QFG联合5-FU相对于单药,可抑制PI3K/AKT信号通路活化,同时可抑制激活PI3K/AKT通路后HCT-8细胞增殖、转移,促进其凋亡作用（P＜0.05）。体内实验:QFG联合5-FU可抑制瘤体体积（P＜0.05）;QFG联合5-FU抑制瘤组织Ki67的表达（P＜0.05）,同时增加TUNEL阳性率（P＜0.05）。QFG联合5-FU相对于单药,可抑制CDK4、Cyclin D1、Bcl-2、N-cadherin、Vimentin、DPD、TS表达（P＜0.05）,增强p53、p21、Bax、cleaved-caspase-3、E-cadherin蛋白表达（P＜0.05）,抑制PI3K/AKT通路活化（P＜0.05）。结论:QFG联合5-FU治疗大肠癌可通过抑制PI3K/AKT信号通路发挥协同增效作用。