【摘 要】
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目的:1.学习和掌握SD大鼠增生性瘢痕造模的技术。2.探索己酮可可碱干预SD大鼠增生性瘢痕的最适浓度。3.研究己酮可可碱对SD大鼠增生性瘢痕TGF-β1/Smad信号转导通路的影响。方法:1.烫伤法造模,SD大鼠固定、麻醉、备皮、消毒,采用自制铜片在加热板上加热,作用在大鼠背部两侧边长为2cm的正方形区域,待其自然生长,28天后取组织做病理证实。2.将造模成功的SD大鼠分为4组,每组3只大鼠,4块
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目的:1.学习和掌握SD大鼠增生性瘢痕造模的技术。2.探索己酮可可碱干预SD大鼠增生性瘢痕的最适浓度。3.研究己酮可可碱对SD大鼠增生性瘢痕TGF-β1/Smad信号转导通路的影响。方法:1.烫伤法造模,SD大鼠固定、麻醉、备皮、消毒,采用自制铜片在加热板上加热,作用在大鼠背部两侧边长为2cm的正方形区域,待其自然生长,28天后取组织做病理证实。2.将造模成功的SD大鼠分为4组,每组3只大鼠,4块瘢痕组织,在瘢痕内分别注射浓度为0.5g/L、1.0g/L、1.5g/L、2.0g/L的己酮可可碱溶液,每周一次,共6周,之后取瘢痕组织病理切片做HE染色,在普通光学显微镜下(HE×400)进行成纤维细胞计数,每张切片每人随机取3个视野,分别计数,共3人重复,结果取3人均数,检测出己酮可可碱的最适浓度。3.根据是否外用尿囊素乳膏保湿将大鼠分为2大组,保湿组和非保湿组,每大组均各分为四小组:(1)实验组(己酮可可碱最适浓度组);(2)阳性对照组(曲安奈德组);(3)阴性对照组(蒸馏水组);(4)空白对照组。除空白对照组之外,其他组在瘢痕内进行相应的干预,每周1次,共6周。每2周取病理组织HE染色,对成纤维细胞进行计数,检测瘢痕成纤维细胞增殖;6周后行手术切取各组瘢痕组织,用western blot方法分别检测TGF-β1、Smad2/3及P-smad2/3的表达。4.对实验结果进行统计学分析。结果:1.用药6周后,2.0g/L的己酮可可碱溶液组的成纤维细胞数量均少于其他浓度组,差异均有统计学意义(P<0.05),2.0g/L为己酮可可碱抑制SD大鼠增生性瘢痕成纤维细胞增殖的最适浓度。2.在保湿与非保湿组中己酮可可碱均可抑制瘢痕成纤维细胞增殖,用药后2周,非保湿组中,实验组成纤维细胞数量较阳性对照组少,但差异无统计学意义(P>0.05);用药后4、6周,实验组成纤维细胞数量较阳性对照组、阴性对照组及空白对照组少,差异均有统计学意义(P<0.05)。4.保湿组与非保湿组大组间各对应小组比较,TGF-β1、Smad2/3及P-smad2/3的表达均无显著性差异(P>0.05)。保湿组小组组间两两比较以及非保湿组小组间两两比较TGF-β1、Smad2/3及P-smad2/3的表达差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:1.成功建立SD大鼠增生性瘢痕模型。2.己酮可可碱可有效治疗SD大鼠增生性瘢痕,最适浓度为2.0g/L。3.己酮可可碱局部注射可以抑制增生性瘢痕成纤维细胞增殖。4.己酮可可碱抑制增生性瘢痕的作用可能不是通过TGF-β1/Smad信号转导通路起作用的。
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