肺炎克雷伯菌是一种机会致病菌,与广泛的医院内感染有关,正常情况下定植于人体的皮肤、口腔、消化道和呼吸道,但它也可能会导致一系列的疾病,包括尿路感染、肺炎和化脓性肝脓肿（Pyogenic liver abscess,PLA）,尤其在免疫系统缺陷的病人。由于碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌（Carbapenem-resistant K.pneumoniae,CRKP）的流行,使它对几乎所有可用的抗菌药物均产生耐药性。美国疾病控制中心（Centers for Disease Control and Prevention,CDC）已经将肺炎克雷伯菌视为紧迫的公共卫生问题。因此有必要开发新型的抗肺炎克雷伯菌的有效疗法。噬菌体是一种天然裂解细菌的病毒。在噬菌体感染宿主菌的过程中,由于细菌表面多糖基质的存在,常常会阻碍噬菌体的吸附。有趣的是,在和细菌共进化的过程中,噬菌体会产生各种多糖解聚酶,可以降解多糖化合物例如荚膜多糖（Capsular polysaccharide,CPS）和胞外多糖（extracellular polysaccharide,EPS）,从而与细菌的表面受体结合。此外,CPS或EPS的解聚使细菌失去了重要的保护屏障,从而对宿主免疫防御系统以及抗菌药物更敏感。在先前发表的研究中,已经报道了各种解聚酶作为佐剂可通过防止生物膜形成或降解成熟的生物膜来对抗耐药性细菌的感染。流行病学研究发现,中国CRKP菌株中主要的荚膜血清型为K47。因此本实验分离、表征、并测序了一株肺炎克雷伯菌噬菌体（SH-KP152226）,它能特异性地感染并裂解K47荚膜型的肺炎克雷伯菌。通过全基因组测序,噬菌体SH-KP152226包含一个41,420 bp大小的基因组,编码48个预测蛋白。在这些编码的蛋白质中,ORF42的基因产物Dep42预测为尾丝蛋白,经生物信息学分析结果显示,其中心区域（残基300-599）具有β-螺旋结构的pectate＿lyase＿3＿,拥有水解果胶的活性。因此预测其可能是一种多糖解聚酶。我们将噬菌体SH-KP152226尾丝蛋白基因（ORF42）克隆至原核表达载体p SUMO3上,构建重组质粒p SUMO3-Dep42,并进行蛋白纯化得到重组解聚酶Dep42。我们的实验结果表明,体外重组表达的Dep42具有降解K47荚膜血清型的肺炎克雷伯氏菌荚膜多糖的活性,并且能够显著抑制生物膜的形成和降解形成的生物膜。我们的结果还显示,通过与抗生素联合使用,Dep42可增强多粘菌素抗CRKP生物膜内细菌的能力。综上所述,由噬菌体SH-KP152226编码的新型多糖解聚酶Dep42与抗生素的联合使用可有效对抗CRKP生物膜的形成,具有潜在的临床应用意义。