论文部分内容阅读
目的通过研究喉咽鳞状细胞癌组织与癌旁组织中DSCR1基因蛋白的表达,了解其表达与肿瘤临床特征的关系,探讨DSCR1基因对下咽鳞状细胞癌的生物学行为的影响,为以DSCR1基因为靶点的抗肿瘤治疗提供生物学依据。方法收集94例喉咽鳞状细胞癌病例,有78例同时取癌旁组织,通过免疫组织化学p-V9000法,使用兔抗DSCR1抗体DCT3,检测DSCR1基因蛋白在喉咽鳞状细胞癌与正常癌旁组织中的表达,数据输入SAS8.2软件进行统计学分析,采用卡方检验比较不同性别、年龄、组织学分级、临床分期、部位、生长方式、淋巴结转移以及吸烟史组间表达差异,配对t检验方法对78例同一病人的肿瘤与癌旁组织中基因蛋白的表达差异进行分析,P<0.05为有统计学意义。结果肿瘤组织中DSCR1基因蛋白表达阳性率94.9%,癌旁组织中表达阳性率35.9%,有极显著统计学意义(t值23.69,P<0.001)；DSCR1基因的表达与组织学分级、TNM分期显著相关(P<0.05)；DSCR1基因的表达与与肿瘤的发病年龄、性别、部位、生长方式、淋巴结转移以及吸烟史均无关(P>0.05)。结论1.在喉咽癌肿瘤组织与癌旁组织中,DSCR1基因蛋白的表达存在明显的差异。2.DSCR1基因与肿瘤的组织学分级有显著关系,分化程度越差,DSCR1基因蛋白的表达阳性率越高,与TNM分期及淋巴结转移的关系有待于进一步研究。3.在喉咽癌的形成及发展进程中,DSCR1基因必定发挥了重要的作用,可能是此基因的失活或功能失调导致了肿瘤的发展不受控制,并影响了肿瘤的生物学特征,是一个很有前途的肿瘤基因治疗靶点。目的通过检测喉咽癌组织与癌旁组织中微血管密度数值,研究血管因素与肿瘤侵袭性间的相关性。并与前期测定的DSCR1基因表达之间做相关性分析,讨论DSCR1基因与喉咽癌血管生成之间的关系,探讨DSCR1基因对喉咽癌的发生、血管新生等生物学行为特性的影响。方法使用免疫组化PV9000方法,在与第一部分相同的94例喉咽鳞状细胞癌病例,通过CD34抗体染色标记血管内皮细胞,计算微血管密度(MVD)值,通过与临床资料进行统计学分析,探讨MVD与各种临床病理参数之间的关系,并通过前期测定的肿瘤组织中DCT3抗体标记的DSCR1基因表达与MVD之间做相关性分析,MVD结果以均数±标准差表示,两组间比较采用t检验(方差齐),三组以上样本间关系采用单因素方差分析,P<0.05表示差异有显著性。MVD与DSCR1表达相关性检验用Spearman相关分析。结果在喉咽癌组织中MVD平均为17.57±10.61条/400倍视野,癌周正常组织为12.61±7.67条/400倍视野,经统计学分析差异显著(P<0.05)。MVD与肿瘤颈淋巴结转移的关系研究发现,转移组中MVD平均为18.96±11.63条/400倍视野,而非转移组为16.17±9.61条/400倍视野,经统计学分析差异显著(P<0.05)；MVD与喉咽癌的病理分级的关系发现,高分化组的MVD平均为16.29±9.98条/400倍视野,中分化组为18.58±10.35条/400倍视野,低分化组为20.48±13.61条/400倍视野,三组比较差异显著(P<0.05)。对瘤内血管密度MVD与肿瘤临床分期的相关性研究表明,TNM分期Ⅰ～Ⅱ组MVD平均为16.13±9.61/400倍视野,而Ⅲ～Ⅳ组为18.43±11.61条/400倍视野,经统计学分析差异显著(P<0.05)；本实验表明MVD与患者的发病年龄、性别、肿瘤生长部位、生长方式及吸烟史等均无明显相关性(P>0.05)；在喉咽癌肿瘤组织中随着MVD的升高,DSCR1基因的表达也逐渐增强,结果具有显著的统计学意义(P<0.0001),且两者之间为正相关的关系(r=0.698)。结论1.喉咽癌组织中MVD与肿瘤的组织学分级、TNM分期、淋巴结转移有关。说明肿瘤不同的生物学特征伴随不同的微血管密度表达,可以通过检测MVD判断喉咽癌的预后,以及高MVD的喉咽癌患者行预防性颈淋巴结清扫及术后的放、化疗等综合治疗是必要的。2.在喉咽癌鳞状细胞癌,随着DSCR1基因的表达活性增加,肿瘤微血管密度的也增强,两者存在正相关的关系,证实了DSCR1基因与肿瘤血管生成的密切相关性,说明DSCR1基因可以影响喉咽癌的侵袭、转移等过程,是很有前途的肿瘤治疗靶点。目的了解VEGF-C mRNA及DSCRl mRNA在喉咽鳞癌组织及癌旁组织中的表达水平,进一步验证VEGF及DSCRl基因与肿瘤的关系,并将VEGF-C mRNA表达水平与DSCR1mRNA水平做相关性分析,探讨DSCR1基因与喉咽癌血管生成之间的关系。方法通过RT-PCR方法检测DSCR1mRNA及VEGF-C mRNA在43例喉咽鳞癌组织及21例癌旁组织中的表达情况,在不同组织学分级、临床分期、淋巴结转移之间进行比较,并对二者的表达进行相关性分析。结果43例喉咽癌中35例可检测到DSCRl mRNA阳性,占81.39%,21例正常癌旁组织中8例可检测DSCR1mRNA阳性,占38.10%,喉咽鳞状细胞癌DSCR1mRNA表达的平均相对光密度值为0.91±0.10,明显高于正常癌旁组织0.61±0.08,差异具有统计学意义(P<0.05)；DSCR1mRNA的表达在不同的组织学分级、及淋巴结转移均有显著差异(P<0.05)。43例喉咽癌32例可检测到VEGF-C mRNA,占74.42%,21例正常组织中6例可检测至VEGF-C mRNA,占28.57%,癌周组织平均相对灰度值为(0.56±0.19),癌内组织平均相对灰度值为(1.21±0.41),二组之间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。43例肿瘤组织中DSCR1mRNA表达与VEGF-C mRNA表达的相关性,经Spearman相关性分析,两者之间成正相关。结论1.在喉咽癌肿瘤组织与癌旁组织中,DSCR1mRNA的表达存在明显的差异。DSCR1与不同的肿瘤组织学分级及淋巴结转移有显著关系,此基因与肿瘤的生物学行为密切相关。2. VEGF-C mRNA的表达从癌周组织到癌内组织相对灰度值呈增高趋势,有显著差异,说明VEGF-C与癌症的发生发展有密切关系。3.在喉咽癌肿瘤组织中DSCR1mRNA表达与VEGF-CmRNA表达呈正相关,DSCR1基因与喉咽鳞状细胞癌的血管生成存在密切关系。