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本研究就不结球白菜对棉疫病菌非寄主抗性相关基因的筛选和其中一个过敏性细胞死亡过程中上调表达的基因BcLCB2的功能进行了研究。采用抑制性差减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)的方法筛选疫霉菌激发子PB90注射处理不结球白菜叶片5h内上调表达的基因。激发子PB90从棉疫病菌Phytophthora boehmeriae中获得。测定分析了200个PB90诱导不结球白菜过敏性细胞死亡早期上调表达的cDNA片段,生物信息学分析表明它们包含70个上调表达的基因,共分为9类:基本能量或代谢生产;蛋白质合成分解;细胞信号传导机制;细胞凋亡;转录;细胞运输和编码未知功能的蛋白等。进一步采用半定量RT-PCR分析了候选基因beclin,thioredoxin,HLA-B,MAP3K SPT1,SPT2和AGO1,表明这7个基因在PB90诱导不结球白菜过敏性细胞死亡早期上调表达。构建了疫霉菌激发子PB90诱导不结球白菜过敏性细胞死亡早期抑制性差减杂交cDNA文库,鉴定了70个上调表达的基因,并对其中7个基因的可能功能进行预测分析,这些基因的挖掘为进一步阐明过敏性细胞死亡的分子机制提供了素材。本文采用RACE从Phytophthora boehmeriae激发子PB90诱发不结球白菜(Brassica campestris ssp.chinensis)早期过敏反应上调表达的基因中获得一个的编码丝氨酸棕榈转移酶亚基的基因BcLCB2,该基因在花和茎中的表达量比叶和根高。采用农杆菌介导的瞬时过量表达法证明BcLCB2在烟草叶片中过量表达可抑制PB90、elicitin、MgNep1(来源于稻瘟菌)、hrflxoo(来源于水稻白叶枯病菌)等4种激发子和动物促凋亡蛋白Bax诱导的烟草过敏反应。DAB染色结果表明BcLCB2过量表达时,H2O2累积量减少。进一步以激发子处理通过病毒诱导基因沉默技术沉默了NbLCB2的本氏烟叶片,发现该基因的沉默加快了激发子诱导的过敏反应。本文还观察到在烟草与青枯菌(Ralstonia solanacearum)亲和互作中,BcLCB2的过量表达明显抑制了病斑的扩展。BcLCB2也可抑制Bax引起的酵母细胞凋亡和抑制凋亡时活性氧的积累;BcLCB2在酵母中表达还可提高酵母细胞对氧化剂的耐受性。上述结果表明BcLCB2是激发子诱发的烟草过敏性细胞死亡和亲和互作中的细胞死亡及Bax诱发酵母细胞凋亡的一个负调控因子,可能通过抑制活性氧的积累来抑制细胞死亡;同时结果还提示植物的过敏性细胞死亡和酵母的细胞凋亡具有保守的调控机制。